沉默P2X4R基因对P2X4/NLRP3炎性小体通路介导的BV2小胶质细胞中肿瘤坏死因子α表达的影响

• 作者: 蔡敏 薛莉 许文帅 谢安木
• 来源期刊: 中国临床神经科学
• 学科: 医学
• 关键词: 脂多糖 三磷酸腺苷 小胶质细胞 P2X4嘌呤受体 NLRP3炎症小体 肿瘤坏死因子α
• 年，卷（期）: 2019,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1-8
• 页数: 8页
• 分类号: Q186|R742.5
• 字数: 6036字
• 语种: 中文

摘要

目的 探讨使用慢病毒(LV-P2rx4)沉默P2X4嘌呤受体(P2X4R)对活化状态小胶质细胞释放肿瘤坏死因子α(TNF-α)的影响.方法 常规建立脂多糖(LPS)和三磷酸腺苷(ATP)双信号诱导的小胶质细胞活化模型,随机分为(1)空白对照组(常规DMEM培养液培养);(2)活化模型组(细胞种板后待密度接近80％后先给予LPS 1μg·m L-1处理6 h后弃原培养液,再加ATP 2 mmol·L-1处理3 h);(3)目的基因阴性对照组(种板1 d,先加入病毒处理12 h后弃培养液,再加入常规培养液,间隔12 h更换培养液);(4)目的基因阴性对照+活化模型组(种板1 d后,先加入病毒处理12 h后弃培养液,再加常规培养液,期间每隔12 h更换培养液,待细胞密度达80％后,予LPS 1μg·m L-1处理6 h后弃原培养液,再加ATP 2 mmol·L-1处理3 h);(5)空载病毒阴性对照组(处理方法同目的基因阴性对照组);(6)空载病毒阴性对照+活化模型组(处理方法同目的基因阴性对照+活化模型组).各组均n=6.细胞处理后每组取3孔分别提取核糖核酸(RNA)和蛋白,应用Real time PCR和Western blot法分别检测NLRP3、TNF-α的mRNA及蛋白的相对表达.结果 与活化模型组和空载病毒阴性对照+活化模型组比较,目的基因阴性对照+活化模型组TNF-αmRNA相对表达水平明显减少(P ＜0.001,F=195.4),TNF-α蛋白相对表达水平显著降低(P ＜0.001,F=60.10).结论 沉默小胶质细胞中的P2X4R基因,可下调细胞中TNF-α表达,继而可能削弱小胶质细胞的炎症反应.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	薛莉	青岛大学附属医院病案室	19	68	5.0	8.0
2	谢安木	青岛大学附属医院神经内科	52	132	6.0	8.0
3	许文帅	青岛大学附属医院神经内科	2	1	1.0	1.0
4	蔡敏	青岛大学附属医院神经内科	2	1	1.0	1.0