检测犬细小病毒和犬瘟热病毒联合PCR/RT-PCR方法的建立及初步应用

• 作者: 修占伍 刘晋宇 孟媛 李远超 高旭 鲁承
• 来源期刊: 黑龙江畜牧兽医（上半月）
• 学科: 农学
• 关键词: 犬细小病毒 犬瘟热病毒 联合PCR/RT-PCR 检测 建立 初步应用
• 年，卷（期）: 2019,（2）
• 所属期刊栏目: 兽医科学
• 页码范围: 88-91
• 页数: 4页
• 分类号: S852.65+5
• 语种: 中文
• DOI: 10.13881/j.cnki.hljxmsy.2018.11.0178

摘要

为了建立一种能同时检测犬细小病毒(CPV)和犬瘟热病毒(CDV)的快速鉴别PCR方法,试验根据GenBank中登录的CPV NS1基因和CDV F基因序列设计2对特异性引物,通过综合CPV单项PCR方法与CDV单项RT-PCR方法的扩增程序,最后确定出联合PCR/RT-PCR方法的最佳退火温度、延伸时间和循环次数等反应程序,并对扩增产物进行克隆鉴定,同时进行特异性试验、敏感性试验和临床病料的检测.结果表明:建立的联合PCR/RT-PCR方法可以在一个扩增体系内同时检测两种病毒,其最佳联合PCR/RT-PCR扩增退火温度为50.8℃;经特异性分析,联合PCR/RT-PCR方法对犬副流感病毒(CPIV)、狂犬病毒(RV)、犬腺病毒(CAV)的检测为阴性;经敏感性分析,联合PCR/RT-PCR方法在模板浓度稀释到1×100 TCID50时仍能见到较清晰的特异性条带;应用联合PCR/RT-PCR方法对延吉市36份犬病料样本进行检测,CPV阳性率为25.00％,CDV阳性率为33.33％,CPV和CDV混合感染阳性率为8.33％.说明试验建立的CPV和CDV联合PCR/RT-PCR检测方法特异性强、敏感性高,可用于犬细小病毒病和犬瘟热病毒病的临床诊断.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	鲁承		67	123	5.0	8.0
2	高旭		48	103	5.0	8.0
3	修占伍		5	4	1.0	2.0
4	刘晋宇		7	15	2.0	3.0
5	李远超		3	1	1.0	1.0
6	孟媛		4	1	1.0	1.0