NLRP3对小鼠肝脏缺血再灌注损伤的影响

• 作者: 伍海锐 孙丽莹 张海明 朱志军 李世朋 王学斌 郭伟 闫非易 韩威
• 来源期刊: 国际外科学杂志
• 关键词: 肝疾病 再灌注损伤 缺血 小鼠 MR家族Pyrin域蛋白3
• 年，卷（期）: 2019,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 300-305,封3
• 页数: 7页
• 字数: 4968字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1673-4203.2019.05.004

摘要

目的 通过探讨NLR家族Pyrin域蛋白3(NLRP3)在小鼠肝脏缺血再灌注损伤(HIRI)肝组织中的表达,来初步判断NLRP3在HIRI过程中的作用.方法 纯系C57BL/6雄性小鼠共42只,7～8周龄,体重为20 ～ 25 g,建立C57BL/6小鼠HIRI模型,采用完全随机化分组的方法将小鼠分为空白对照组,假手术组,2h、6h、12 h、24 h HIRI组及NLRP3抑制剂组(CY-09组),每组各6只.收集各组小鼠肝脏标本.各组小鼠血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)水平使用全自动生化分析仪检测;各组小鼠血清白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-18(IL-18)、肿瘤坏死因子-o(TNF-α)含量使用酶联免疫吸附实验(ELISA)检测;用苏木精-伊红染色及氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL)染色病理学检测方法观察各组小鼠肝脏标本细胞凋亡情况;用Western blotting检测各组小鼠炎症因子NLRP3、凋亡蛋白-1(Caspase-1)表达水平.计量资料以均数±标准差(Mean±SD)表示,组间比较采用单因素方差分析,如方差不齐则采用Dunnett C检验.结果 各HIRI组小鼠血清ALT、AST水平和血清IL-1β、IL-18、TNF-α含量显著高于空白对照组及假手术组(P＜0.05);各HIRI组的NLRP3和Caspase-1蛋白相对表达量显著增加.CY-09组小鼠血清ALT、AST水平和血清IL-1β、IL-18、TNF-α含量显著低于各HIRI组(P＜0.05);CY-09组肝脏组织苏木精-伊红染色坏死区域明显少于各HIRI组;TUNEL染色提示CY-09组小鼠肝细胞凋亡率显著低于12 h HIRI组(P＜0.05);CY-09组NLRP3蛋白相对表达量较各H1RI组小鼠显著下降,Caspase-1蛋白水平较各HIRI组显著下降.结论 HIRI可引起NLRP3表达增加,抑制NLRP3的表达后,HIRI的程度相对减轻.