微小RNA-23b-3p通过靶向TGFBR3促进人心房肌成纤维细胞纤维化相关基因表达

• 作者: 单志新 吴书林 朱文思 朱杰宁 杨真祯 林秋雄 符永恒 肖珍 谭虹虹
• 来源期刊: 中国病理生理杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 心肌纤维化 成纤维细胞 微小RNA-23b-3p 转化生长因子β受体3
• 年，卷（期）: 2019,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 119-125
• 页数: 7页
• 分类号: R329.21|R541.7+5
• 字数: 4820字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-4718.2019.01.019

摘要

目的:探究微小RNA-23b-3p(miR-23b-3p)对人心房肌成纤维细胞中纤维化相关基因表达的作用及其可能作用靶基因.方法:分离并体外培养房颤患者心耳中原代心房肌成纤维细胞,并用细胞免疫荧光染色实验鉴定;双萤光素酶报告基因实验检测miR-23b-3p与潜在靶基因转化生长因子 β受体3(TGFBR3)3'端非翻译区(3'-UTR)的结合作用;CCK-8、EdU染色及Transwell实验检测细胞活力、增殖及迁移能力,RT-qPCR和Western blot法检测TGFBR3及纤维化相关基因的mRNA和蛋白表达.结果:在人心房肌成纤维细胞中过表达miR-23b-3p不影响细胞的活力、增殖及迁移能力,但可显著增强细胞中纤维化相关基因COL1A1、COL3A1和ACTA2的表达(P<0.05或P<0.01).双萤光素酶报告基因实验显示miR-23b-3p与TGFBR33'-UTR有结合作用.RT-qPCR和Western blot结果证实miR-23b-3p可在转录水平抑制TGFBR3表达.过表达miR-23b-3p和沉默TGFBR3均能显著促进人心房肌成纤维细胞中Smad3激活和纤维化相关基因表达(P<0.05或P<0.01).结论:TGFBR3是miR-23b-3p的作用靶基因,并介导miR-23b-3p促进心房肌成纤维细胞中纤维化相关基因表达.