DKK1对胃癌AGS细胞增殖、周期和凋亡的影响

• 作者: 周建奖 杨丽萍 王琴容 谢渊 赵艳 陈学书 骆梅 龙妮娅
• 来源期刊: 中国肿瘤生物治疗杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 厚体1基因 胃癌 AGS细胞 增殖 细胞周期 凋亡
• 年，卷（期）: 2019,（12）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 1324-1330
• 页数: 7页
• 分类号: R392.11|R735.2
• 语种: 中文
• DOI: 10.3872/j.issn.1007-385x.2019.12.005

摘要

目的:探讨沉默厚体1(DKK1)基因对胃癌AGS细胞增殖、周期和凋亡的影响及其作用机制.方法:构建DickkopfsiRNA(DKK1-siRNA)稳定转染细胞株,提取稳定转染细胞的RNA及总蛋白,qPCR和WB实验分别检测DKK1 mRNA及蛋白的表达水平.实验分为空白对照(Control)组、阴性对照(shNC)组及沉默DKK1 (DKK1-shRNA)组,CCK-8实验检测各组培养0、24、48、72、96、120、144 h后AGS细胞的增殖情况,流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡水平.检索HPA数据库,分析DKK1与胃癌临床病理的关系.结果:成功建立了稳定沉默DKK1基因的胃癌细胞株AGS,证实DKK1-shRNA组细胞中DKK1 mRNA及蛋白表达水平分别比Control组和shNC组降低到72％和47％(均P＜0.05).细胞增殖曲线显示,与Control和shNC组比较,DKK1-shR-NA组细胞培养72h后其增殖显著降低(P＜0.05).与shNC组比较,DKK1-shRNA组S期细胞从32.06％降低到25.87％,G2/M期细胞由8.49％上升到21.26％,细胞凋亡率从10.34％上升到20.65％,差异均有统计学意义(均P＜0.05).HPA数据库的分析显示,胃癌组织中DKK1 mRNA水平显著高于胃正常组织,DKK1 mRNA的高表达与胃癌患者生存率呈负相关(均P＜0.05).结论:沉默DKK1基因可抑制胃癌AGS细胞的增殖,阻滞细胞于G2/M期并促进细胞凋亡;DKK1在胃癌中发挥促癌作用.