X-盒结合蛋白1条件性基因敲除小鼠模型的建立

• 作者: 刘天喜 刘永鑫 宋琼 许国双
• 来源期刊: 中华肾病研究电子杂志
• 关键词: X-盒结合蛋白1 非折叠蛋白反应 内质网应激 条件性基因敲除 Cre/loxp系统
• 年，卷（期）: 2019,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 13-18
• 页数: 6页
• 字数: 4576字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3877/cma.j.issn.2095-3216.2019.01.004

摘要

目的 建立可进行条件性敲除X-盒结合蛋白1(Xbp1)基因的flox杂合子小鼠.方法 通过ET-clone的方法构建基于cre-loxp系统和FLP-frt系统的条件性基因打靶载体.载体线性化后电转JM8A3 ES细胞,经G418和Ganc筛选获得抗性ES细胞克隆.经长片段PCR鉴定获得正确同源重组的阳性克隆.阳性ES细胞经克隆扩增后,注射入C57BL/6J小鼠的囊胚中,获得嵌合鼠,筛选出高比例嵌合小鼠与野生型C57BL/6J小鼠交配后获得阳性F1代小鼠,并分别进行PCR和测序鉴定.结果 成功构建打靶载体,共获得144个抗性ES细胞,克隆经长片段PCR鉴定,共获得4个正确同源重组的阳性克隆.获得4只阳性F1代小鼠,经测序鉴定正确.Xbp1基因flox杂合子小鼠表型无明显异常.结论 成功构建了条件性敲除Xbp1基因的flox杂合子小鼠,为未来研究器官或组织特异性的Xbp1生物学作用奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	许国双	第四军医大学西京医院肾脏内科	31	173	8.0	12.0
2	刘天喜	兰州大学第一医院肾脏内科	38	232	8.0	14.0
3	刘永鑫		1	0	0.0	0.0