基于URP-PCR多态性片段的苦瓜枯萎病菌特异性检测技术的建立

• 作者: 丁胜利 文才艺 李震 赵莹 郭康迪
• 来源期刊: 植物病理学报
• 学科: 农学
• 关键词: URP-PCR多态性片段 苦瓜枯萎病 尖孢镰孢菌苦瓜专化型 分子检测
• 年，卷（期）: 2019,（3）
• 所属期刊栏目: 细胞生物学、生理学、生物化学、分子生物学
• 页码范围: 306-313
• 页数: 8页
• 分类号: S432.44|S436.42
• 语种: 中文
• DOI: 10.13926/j.cnki.apps.000371

摘要

通过URP(Universal Rice Primers)-PCR分析尖孢镰孢菌苦瓜专化型基因组DNA扩增片段多态性,筛选检测尖孢镰孢菌苦瓜专化型的特异性引物,并建立了基于该引物的PCR检测方法.结果 表明,特异性引物为FOMM-SPF/FOMM-SPR,PCR检测体系为25μL,包括2×Green Taq Master Mix 12.5 μL,10 mmol ·L-1的上下游引物各1 μL,模板DNA 1 μL,灭菌去离子水补足至25 μL;PCR程序为95℃预变性3 min,94℃变性15 s,57℃退火30 s,72℃延伸20 s,共30个循环,循环结束后72℃延伸5 min;特异性扩增片段大小294 bp,检测灵敏度为2 ng· μL-1 DNA或50个孢子·500 mg-1土壤.该引物及其检测方法对尖孢镰孢菌苦瓜专化型的检测特异性好、灵敏度高,可以从土壤和植物样品中快速准确地检测出苦瓜枯萎病菌,无需病原菌的分离培养和致病性检测,对苦瓜枯萎病的早期诊断和预警及有效防控具有重要的指导意义.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	文才艺		34	194	7.0	11.0
2	郭康迪		3	1	1.0	1.0
3	赵莹		4	2	1.0	1.0
4	李震		1	0	0.0	0.0
5	丁胜利		3	1	1.0	1.0