Fibulin-3表达对恶性胸膜间皮瘤细胞的影响

• 作者: 刘焕鹏 张良 李珏 莫世贤 赵金燕 邓勇军 陈理军
• 来源期刊: 中国病理生理杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 恶性胸膜间皮瘤 短发夹RNA 纤蛋白3 间皮素 基因沉默
• 年，卷（期）: 2019,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 448-453
• 页数: 6页
• 分类号: R734.3|R363.2
• 字数: 3672字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-4718.2019.03.011

摘要

目的:研究纤蛋白3(fibulin-3)基因过表达/沉默对人恶性胸膜间皮瘤(malignant pleural mesothelio-ma,MPM)细胞系SMC-1的影响,为MPM的治疗寻找新的方法.方法:分别构建fibulin-3过表达和短发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)载体,并将SMC-1细胞分别转染空白对照载体(control)、过表达载体(Exp)、过表达对照载体(Exp-NC)、干扰载体(shRNA1、shRNA2、shRNA3和shRNA4)和干扰对照载体(shRNA-NC).应用流式细胞术检测细胞周期及凋亡,real-time PCR法和Western blot法检测过表达/干扰前后fibulin-3的表达情况.结果:SMC-1细胞转染相应载体后,流式细胞术结果显示,与control组相比,fibulin-3+Exp组的G2期细胞数量增加(P<0.05),shRNA2组的G2期数量减少(P<0.05);凋亡检测结果显示,与control组相比,Exp组的细胞凋亡率下降(P<0.05),而shRNA2组的细胞凋亡率上升(P<0.05).分子水平检测结果显示,与control组相比,Exp组fibulin-3和间皮素(mesothelin)的mRNA和蛋白表达水平上调(P<0.05),各shRNA组fibulin-3和mesothelin的mRNA和蛋白表达水平下调(P<0.05).结论:本实验构建了fibulin-3基因的过表达及沉默载体,证实转染Exp和shRNA能有效改变fibulin-3的表达水平及SMC-1细胞的生长,为以fibulin-3为靶点的RNA沉默手段应用于临床MPM的治疗提供了实验依据.