原因不明复发性自然流产患者外周血IL-6、let-7d-5p水平变化及其关系

• 作者: 周宪宾 尹训强 张云虹 张振 朱肖肖 李霞 王东梅 褚楚 谷兆琪 赵霖 郭强 魏然
• 来源期刊: 山东医药
• 学科: 医学
• 关键词: 原因不明复发性自然流产 微小核糖核酸 白细胞介素6 母胎免疫耐受 生殖免疫
• 年，卷（期）: 2019,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 23-27
• 页数: 5页
• 分类号: R392
• 字数: 4250字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-266X.2019.02.006

摘要

目的 观察原因不明复发性自然流产 (URSA) 患者外周血白细胞介素6 (IL-6) 、微小核糖核酸 (miRNA) let-7d-5p水平变化, 探讨二者在URSA发病中的关系.方法 选取正常早孕妇女 (正常妊娠组) 和URSA患者 (URSA组) 各30例, 空腹抽取其外周静脉血, ELISA法检测血清IL-6蛋白, q PCR法检测单个核细胞 (PBMC) 中的let-7d-5p.采用Target Scan生物信息软件, 以Target Scan 7. 1程序预测let-7d-5p与IL-6 mRNA的3'非翻译区 (3'UTR) 是否存在潜在结合位点;将293T细胞分为干预组和对照组, 分别同时转染let-7d-5p (空白对照NC) 与野生型或突变型IL-6 mRNA 3'UTR荧光素酶报告基因pmir GLO载体, 采用双荧光素酶报告基因系统检测荧光素酶报告基因活性.将293T细胞分为3组, 过表达组、抑表达组利用Lipofectamine 2000转染let-7d-5p mimics及inhibitor, 空白对照组转染阴性对照引物;转染24 h后收集细胞, q PCR检测各组细胞中的IL-6 mRNA, ELISA检测各组培养上清液中的IL-6.结果 与正常妊娠组比较, URSA组外周血IL-6蛋白水平升高, 而PBMC中let-7d-5p表达降低 (P均<0. 05) .Target Scan 7. 1程序预测显示, let-7d-5p与IL-6 mRNA的3'UTR之间具有潜在的碱基互补结合位点;双荧光素酶报告基因系统检测显示, 与对照组比较, 干预组能降低野生型IL-6 mRNA 3'UTR荧光素酶报告基因活性 (P <0. 05) , 但对突变型IL-6 mRNA 3'UTR荧光素酶报告基因活性无明显影响 (P> 0. 05) .与空白对照组比较, 过表达组细胞中IL-6 mRNA表达及细胞上清液中IL-6水平降低 (P均<0. 05) , 抑表达组细胞中IL-6 mRNA表达及细胞上清液中IL-6水平升高 (P均<0. 05) .结论 URSA患者血清IL-6蛋白水平升高, 而PBMC中let-7d-5p表达降低; let-7d-5p与IL-6 mRNA 3'UTR结合并抑制IL-6表达, 靶向let-7d-5p调控IL-6表达可能成为URSA治疗的有效途径.