微小隐孢子虫Ⅰ型跨膜蛋白Cgd7_4560的亚细胞定位及其对HCT-8细胞的黏附特性

• 作者: 尹继刚 张天宇 焦新 王东强 王科杰 邵清延
• 来源期刊: 吉林农业大学学报
• 学科: 农学
• 关键词: 微小隐孢子虫 Ⅰ型跨膜蛋白 原核表达 亚细胞定位
• 年，卷（期）: 2019,（3）
• 页码范围: 359-364
• 页数: 6页
• 分类号: R38|S852.7
• 语种: 中文
• DOI: 10.13327/j.jjlau.2019.4223

摘要

Ⅰ型跨膜蛋白在顶复门寄生虫入侵宿主细胞过程中发挥重要作用.试验对微小隐孢子虫Ⅰ型跨膜蛋白Cgd7_4560进行生物信息学分析,选取抗原性强的序列,采用PCR方法扩增出微小隐孢子虫DNA Cgd7_4560部分基因.将该片段分别连接到pET-28a和pGEX-4T-1载体,构建重组表达质粒pET-28a-Cgd7_4560和pGEX-Cgd7_4560,并将其转化到大肠埃希氏杆菌BL21(Condon plus),IPTG诱导表达获得重组蛋白.SDS-PAGE和Western blot分析,His标签重组蛋白为31 ku,GST标签重组蛋白为53 ku.用His标签重组蛋白免疫家兔,间接ELISA方法检测血清抗体效价达到1:16000,成功制备多克隆抗体.采用Western blot方法验证该抗体能够特异性的识别虫体天然蛋白,间接免疫荧光分析该蛋白在子孢子头端,间接ELISA结果表明GST-Cgd7_4560能与HCT-8细胞黏附,为其功能研究奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王科杰	吉林大学人兽共患病研究所人兽共患病研究教育部重点实验室	2	1	1.0	1.0
2	邵清延	吉林大学人兽共患病研究所人兽共患病研究教育部重点实验室	3	1	1.0	1.0
3	张天宇	吉林大学人兽共患病研究所人兽共患病研究教育部重点实验室	5	16	1.0	4.0
4	王东强	吉林大学人兽共患病研究所人兽共患病研究教育部重点实验室	3	1	1.0	1.0
5	焦新	吉林大学人兽共患病研究所人兽共患病研究教育部重点实验室	1	0	0.0	0.0