稳定敲除CACYBP/SIP基因的 MCF-7细胞株的构建及其细胞增殖的变化

• 作者: 吴媛媛 王会峰 王宁菊 王燕 赵志军
• 来源期刊: 基础医学与临床
• 学科: 医学
• 关键词: CRISPR/Cas9系统 CACYBP/SIP MCF-7细胞
• 年，卷（期）: 2019,（12）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 1682-1688
• 页数: 7页
• 分类号: R73-37
• 字数: 3994字
• 语种: 中文

摘要

目的 利用CRISPR/Cas9系统构建CACYBP-/-乳腺癌MCF-7基因缺陷细胞株,并研究该基因敲除株对细胞增殖能力的影响.方法 设计特异sgRNA序列,构建Lenti-CAS9-sgRNA-puro质粒,转染MCF-7细胞,puromycin抗性筛选,Cruiser检测sgRNA活性,极限稀释法筛选单克隆株,Western blot检测CACYBP/SIP蛋白的表达,Brdu和MTT试剂盒检测CACYBP/SIP缺失后细胞增殖能力.结果 成功构建Lenti-CAS9-sgRNA-puro质粒,puromycin最佳筛选浓度为0.9μg/mL,sgRNA1活性最高,获得的单克隆系测序唯一敲除CACYBP/SIP的MCF-7细胞株增殖能力减弱(P<0.05).结论 敲除CACYBP/SIP的MCF-7细胞株增殖能力减弱.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王宁菊	宁夏医科大学总医院肿瘤医院肿瘤内科	38	128	5.0	9.0
2	赵志军	宁夏医科大学总医院医学实验中心	66	264	9.0	12.0
3	王燕	宁夏医科大学总医院肿瘤医院肿瘤内科	39	49	4.0	5.0
4	吴媛媛	宁夏医科大学总医院肿瘤医院肿瘤内科	12	27	3.0	4.0
5	王会峰	宁夏医科大学总医院肿瘤医院肿瘤内科	8	19	2.0	4.0