葛根素通过抑制线粒体凋亡通路和调节HSP72表达缓解热应激诱导的LLC-PK1细胞凋亡

• 作者: 丛霞 丰艳妮 姜忠玲 曹荣峰 朱雨凝 李华涛 王若冰 田文儒
• 来源期刊: 农业生物技术学报
• 学科: 农学
• 关键词: 葛根素 猪近端肾小管细胞(LLC-PK1) 热应激 凋亡 热休克蛋白(HSPs)
• 年，卷（期）: 2019,（11）
• 所属期刊栏目: 研究论文与报告
• 页码范围: 2004-2012
• 页数: 9页
• 分类号: S854.53
• 字数: 4817字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2019.11.011

摘要

葛根素对动物具有解热作用,但其作用机制尚不清楚.本研究目的在于明确葛根素是否对受热应激猪(Sus scrofa)近端肾小管细胞(pig kidney proximal tubular cells,LLC-PK1)具有保护作用及其潜在机制.本研究将LLC-PK1细胞分为对照(C)组,热应激(HS,42℃)组,葛根素(Pue,10μmol/L)组和热应激加葛根素(HS+Pue)组.分别用CCK-8和流式细胞术检测细胞生存率和凋亡率,使用qRT-PCR和Western blot分别检测B细胞淋巴瘤-2(B-cell lymphoma,Bcl),Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2 associated X protein,Bax)、细胞色素c(cytochrome c,Cyto c)和细胞凋亡诱导因子(apoptosis inducing factor,AIF)mRNA和蛋白表达水平,用相应试剂盒检测半胱天冬酶(cysteinyl aspartate specific proteinase,caspase)Caspase-9和Caspase-3活性及热休克蛋白(heat shock proteins,HSPs)HSP72和HSP90的含量.结果发现,葛根素抑制LLC-PK1线粒体Cyto c的释放和AIF mRNA的表达,并降低热应激条件下LLC-PK1细胞中Caspase-9和Caspase-3的活性.同时,热应激加葛根素组细胞中Bcl与Bax的比率以及HSP72的表达增加,HSP90的表达降低.上述结果表明,葛根素能降低热应激诱导的LLC-PK1细胞损伤,其机制是通过抑制线粒体凋亡通路的激活,上调细胞HSP72的表达来实现的.本研究揭示了葛根素抑制热应激诱导的LLC-PK1细胞损伤的部分机制,为临床上使用葛根素作为抗热应激的有效药物提供了基础资料.