利用微秒和微纳秒脉冲电场诱导细胞融合

• 作者: 刘雪芹 吴梦 李成祥 柯强 肖普英 葛良鹏
• 来源期刊: 生物技术
• 学科: 生物学
• 关键词: 微秒 纳秒 复合脉冲 电融合 骨髓瘤细胞
• 年，卷（期）: 2019,（6）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 551-557
• 页数: 7页
• 分类号: Q813.2
• 语种: 中文
• DOI: 10.16519/j.cnki.1004-311x.2019.06.0091

摘要

[目的]以小鼠骨髓瘤(SP2/0)细胞作为实验材料,比较了SP2/0细胞在不同微秒(μs)脉冲和微纳秒(μs/ns)复合脉冲电融合的细胞存活率和融合率,并确定了最优的μs/ns复合脉冲电融合参数.[方法]将SP2/0细胞分别用Hoechst 33342和碘化丙啶(PI)进行染色,分别选取3组μs脉冲和3组μs/ns复合脉冲对染色后的SP2/0细胞进行电融合,通过荧光显微镜观察融合后细胞的存活率和融合率.[结果]对比不同μs和μs/ns复合脉冲电融合存活率和融合率结果得知,μs/ns复合脉冲比μs脉冲电融合效果更好,且电融合参数为2.5 kV/cm、20μs、1次,10 kV/cm、200 ns、8次时存活率和融合效率相对最好,存活率和融合率分别为88.5％±6.2％和80.1％±2.6％.[结论]通过采用不同μs和μs/ns复合脉冲电融合比较了SP2/0细胞的存活率和融合效率,结果显示μs/ns复合脉冲电融合参数在2.5 kV/cm、20 μs、1次,10 kV/cm、200 ns、8次时,存活率比μs脉冲电融合提高6.4％,融合率提高23.3％,为利用μs/ns复合脉冲研究杂交瘤细胞电融合奠定了基础.