RNA干扰高迁移率族蛋白1对Aβ25-35刺激HT22细胞中晚期糖基化终末产物受体/ToII样受体4信号通路相关蛋白表达的影响

• 作者: 刘煜 戈文威 曹红 李军 王孝庆 韩园
• 来源期刊: 中国药理学与毒理学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 小干扰RNA 高迁移率族蛋白1 β淀粉样蛋白 HT22细胞 NF-κB
• 年，卷（期）: 2019,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 250-256
• 页数: 7页
• 分类号: R966
• 字数: 4615字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3867/j.issn.1000-3002.2019.04.002

摘要

目的 研究RNA干扰高迁移率族蛋白1(HMGB1)对β淀粉样蛋白片段25-35(Aβ25-35)刺激HT22细胞HMGB1、晚期糖基化终末产物受体(RAGE)、Toll样受体4(TLR4)、NF-κB、白细胞介素1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)等蛋白表达的影响.方法 Aβ25-350,2.5,5,10,20和40μmol·L-1作用HT22细胞24 h后,MTT法检测细胞存活,计算半数抑制浓度(IC50).将对数生长期的HT22细胞分为5组:正常细胞对照组、Aβ25-3540μmol·L-1组、小干扰RNA(siRNA)50μmol·L-1组、siRNA或scramble siRNA+Aβ25-35组(HT22细胞转染siRNA或scramble siRNA 50μmol·L-1作用24 h后,再加入终浓度为40μmol·L-1人工合成的Aβ25-35处理24 h),显微镜观察细胞形态变化,免疫荧光检测HMGB1在细胞中位置的改变,Western印迹法检测细胞内HMGB1,RAGE,TLR4和NF-κB P65的表达,ELISA法检测细胞上清液中IL-1β和TNF-α的水平.结果 Aβ25-35作用HT22细胞24 h,IC50为41.17μmol·L-1.后续采用Aβ25-3540μmol·L-1进行实验.Aβ25-3540μmol·L-1作用24 h后,细胞大量死亡,聚集成团,突起减少,细胞间隙增大,且HMGB1从核内转移至核外.细胞内的HMGB1,RAGE,TLR4和NF-κB P65表达均显著升高(P<0.05),细胞上清液中IL-1β和TNF-α的水平显著升高(P<0.05);经siRNA 50μmol·L-1处理24 h,可显著降低细胞内HMGB1,RAGE,TLR4和NF-κB P65的表达(P<0.05)及细胞上清液中IL-1β和TNF-α的水平(P<0.05).结论 RNA干扰HMGB1可减少Aβ25-35刺激HT22细胞HMGB1,RAGE,TLR4和NF-κB P65的表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李军		111	514	12.0	15.0
2	曹红	温州医科大学附属第二医院育英儿童医院麻醉与围术期医学科	31	101	6.0	8.0
3	韩园	温州医科大学附属第二医院育英儿童医院麻醉与围术期医学科	7	25	2.0	5.0
4	刘煜	温州医科大学附属第二医院育英儿童医院麻醉与围术期医学科	1	0	0.0	0.0
5	戈文威	温州医科大学附属第二医院育英儿童医院麻醉与围术期医学科	1	0	0.0	0.0
6	王孝庆	温州医科大学附属第二医院育英儿童医院麻醉与围术期医学科	3	16	2.0	3.0