VPA0961对副溶血弧菌运动能力的调控

• 作者: 仇越 唐浩 张义全 袁睿韬 黄新祥
• 来源期刊: 江苏大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 副溶血弧菌 VPA0961 鞭毛 游动 爬动
• 年，卷（期）: 2019,（3）
• 所属期刊栏目: 检验医学
• 页码范围: 248-252
• 页数: 5页
• 分类号: R378.3
• 字数: 3607字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13312/j.issn.1671-7783.y190025

摘要

目的:构建vpa0961基因突变株及其回补株,并初步探究VPA0961对副溶血弧菌运动能力的调控作用.方法:以副溶血弧菌RIMD2210633野生株的基因组DNA为模板,PCR扩增得到vpa0961的同源臂融合片段,并克隆至自杀质粒pDS132多克隆位点.将pDS132重组质粒通过结合转移的方式转入野生株,进而通过同源重组方法替换原始vpa0961,制备vpa0961无痕突变株(Δvpa0961).PCR扩增vpa0961整个编码区序列,并将其直接克隆入pBAD33质粒,获得重组回补质粒.将回补质粒结合转移到 Δvpa0961中,然后通过特异性引物PCR鉴定并外送测序以获得回补株.将副溶血弧菌的预培养物接种于游动(swimming)和爬动(swarming)平板,37℃ 静置培养,比较不同菌株间菌苔直径的差异.采用qRT-PCR分析鞭毛蛋白基因lafA、flaB和flaF的mRNA表达水平.结果:特异性扩增及序列分析显示,成功构建vpa0961基因突变株和回补株;与野生株相比,Δvpa0961游动能力和爬动能力明显减弱(t=14.06,36.37,P<0.05);与野生株相比,Δvpa0961 lafA、flaB和flaF mRNA转录水平明显降低(t=185.2,56.36,50.24,P<0.05).结论:成功构建vpa0961的基因突变株和回补株,且VPA0961对鞭毛基因的转录具有正调控作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	黄新祥	江苏大学医学院	57	333	5.0	17.0
2	唐浩	江苏大学医学院	4	2	1.0	1.0
3	仇越	江苏大学医学院	2	0	0.0	0.0
4	袁睿韬	江苏大学医学院	2	0	0.0	0.0
5	张义全	江苏大学医学院	7	10	2.0	3.0