副溶血弧菌VPA1405多克隆抗体制备及应用

• 作者: 刘梦颖 周冬生 张义全 杨世亚 杨瑞馥 王丽 邱景富 闫小娟
• 来源期刊: 军事医学
• 学科: 生物学
• 关键词: 副溶血弧菌 生物膜 Western印迹
• 年，卷（期）: 2013,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 118-121,125
• 页数: 5页
• 分类号: Q93-31
• 字数: 4342字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7644/j.issn.1674-9960.2013.02.009

摘要

目的 建立副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus,VP)的Western印迹方法.方法 将VPA1405基因克隆到pET-28a(+)载体,转入大肠杆菌BL21中进行不可溶性表达,在变性条件下纯化得到VPA1405蛋白,制备的包涵体溶液直接免疫兔得到多克隆抗体,进而利用Western印迹检测VPA1405蛋白在野生株(WT)和opaR基因敲除株(△opaR)中表达水平的差异.结果 成功表达纯化了6个与生物膜相关基因的蛋白；Western印迹结果显示OpaR调控子对VPA1405基因的表达呈正调控,这与表型实验结果相符.结论 成功建立了VP的Western印迹实验平台,该平台可用于后续VP生物膜相关基因的调控研究.