恩诺沙星多克隆抗体制备技术的优化及其ELISA分析方法的建立

• 作者: 侍苗苗 吴康 宋学宏 徐逍 杨彩根
• 来源期刊: 中国抗生素杂志
• 关键词: 中华绒螯蟹 恩诺沙星 多克隆抗体 酶联免疫吸附测定
• 年，卷（期）: 2014,（12）
• 所属期刊栏目: 分析质控与制剂
• 页码范围: 914-919
• 页数: 6页
• 分类号: R978.1|S859.84
• 语种: 中文

摘要

目的 优化人工抗原合成条件及免疫程序,制备亲和力高、特异性强及检测限低的多克隆抗体,并建立适用中华绒螯蟹中恩诺沙星残留检测的免疫学分析方法.方法 采用优化的碳二亚胺法合成免疫原(cBSA-ENR)、N-羟基琥珀酰亚胺活性酯法合成包被抗原(cOVA-ENR)及免疫方式等技术,制备恩诺沙星多克隆抗体并用方阵ELISA及间接竞争ELISA对其滴度、亲和力及特异性进行分析,进而应用于中华绒螯蟹加标样品回收率和精密度的检测.结果 恩诺沙星多抗的工作浓度为1∶80000,IC50为8.68ng/mL,有效检测范围为0.4～125ng/mL,与环丙沙星等竞争物的交叉反应率均小于0.5％;分别在中华绒螯蟹血淋巴、肌肉、肝胰腺样品中添加10、30和90ng/g (ng/mL)3个浓度水平的恩诺沙星,平均回收率分别为72.23％～85.45％、68.66％～74.12％和50.17％～56.30％,相对标准偏差分别为7.64％～12.26％、12.41％～22.23％和28.28％～35.40％.结论 通过优化制备技术获得恩诺沙星多克隆抗体,并建立的免疫分析方法能够满足中华绒螯蟹等水产品中恩诺沙星残留检测的基本要求.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	宋学宏	苏州大学医学部基础医学与生物科学学院	127	1646	23.0	36.0
2	杨彩根	苏州大学医学部基础医学与生物科学学院	59	686	16.0	25.0
3	徐逍	苏州大学医学部基础医学与生物科学学院	5	24	3.0	4.0
4	吴康	苏州大学医学部基础医学与生物科学学院	34	520	14.0	22.0
5	侍苗苗	苏州大学医学部基础医学与生物科学学院	3	23	3.0	3.0