肠炎沙门菌菌影的制备及其作为疫苗载体的特性分析

• 作者: 刘夕珑 周芳鸣 堵嘉诚 成伟 杨慧 焦红梅 郑文浩
• 来源期刊: 中国病原生物学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 噬菌体裂解基因E 沙门菌菌影 疫苗载体
• 年，卷（期）: 2019,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 315-318,322
• 页数: 5页
• 分类号: R378.22
• 语种: 中文
• DOI: 10.13350/j.cjpb.190313

摘要

目的 制备肠炎沙门菌菌影并对其作为疫苗载体的特性进行研究. 方法 以带有噬菌体裂解基因E的溶菌质粒为模板,温控溶菌盒EBOX经PCR扩增和酶切后重组到pBBR1MCS2载体中并导入沙门菌,经42℃诱导表达后测定裂解效率;将真核表达载体pEGFP-N1负载沙门菌菌影后转染小鼠巨噬细胞,荧光显微镜观察和流式细胞仪检测GFP的表达情况;用负载重组质粒pVAX1-NspA的沙门菌菌影经口灌胃免疫BALB/c小鼠,ELISA检测诱导抗体产生情况. 结果 重组菌诱导后的裂解效率达99％.沙门菌菌影负载pEGFP-N1转染小鼠巨噬细胞后可检测到GFP的表达.3次免疫两周后,负载重组质粒pVAX1-NspA沙门菌菌影免疫小鼠特异性血清IgG水平和黏膜IgA水平(A450值)分别为0.60±0.05和0.53±0.06,负载pVAX1沙门菌菌影免疫组分别为0.32±0.07和0.22±0.03,差异有统计学意义(P＜0.01). 结论 制备的肠炎沙门菌菌影免疫能诱导特异性IgG和IgA抗体产生,可作为疫苗载体介导抗原的表达.