SLUG基因可调控性干扰载体的构建及其在鼻咽癌细胞中的表达

• 作者: 刘芳 周来勇 李晓鸣 柳玉红 邹桂华
• 来源期刊: 南昌大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 鼻咽肿瘤 高转移人鼻咽癌细胞株5-8F、5-8F-H3细胞 SLUG基因 可调控性干扰载体
• 年，卷（期）: 2019,（3）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 33-37
• 页数: 5页
• 分类号: R739.62|Q786
• 字数: 3240字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13764/j.cnki.ncdm.2019.03.008

摘要

目的 探讨鼻咽癌细胞中基因表达,构建可调控性相关基因干扰载体,并验证其干扰作用.方法 将高转移人鼻咽癌细胞株5-8F、5-8F-H3细胞进行培养,实时荧光定量RT-PCR检测5-8F及5-8F-H3细胞中SLUG、CBX3、MAD2L1、PLAU、HMGA1基因的表达水平.应用酶切、连接技术构建pSUPERIOR-SLUG干扰载体,采用脂质体转染方法转染5-8F-H3细胞,经嘌呤霉素筛选获得阳性克隆,实时荧光定量RT-PCR检测干扰效果.结果5-8F及5-8F-H3细胞中SLUG基因表达水平均明显高于CBX3、MAD2L1、PLAU、HMGA1基因(均P<0.05),相对倍数分别为(11.23±1.78)倍、(1.23±0.17)倍、(1.57±0.27)倍、(6.36±0.38)倍、(3.66±1.14)倍,以SLUG基因倍数最高.所构建的pSUPERIOR-SLUG重组质粒,经酶切鉴定及序列分析证实为所需的目标序列,并成功转染鼻咽癌5-8F-H3细胞.阳性克隆S2-18基因表达水平高于阳性克隆S1-7、S1-9、S2-22基因(P<0.05),干扰率分别为67.42％、72.45％、84.20％、75.61％.结论 SLUG 基因在鼻咽癌 5-8F-H3 中高表达.成功构建了重组质粒——pSUPERIOR-SLUG,并成功转染鼻咽癌 5-8F-H3 细胞,为后续进一步研究 SLUG 在鼻咽癌的作用奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	周来勇	南方医科大学附属深圳宝安医院病理科	7	67	3.0	7.0
2	刘芳	南方医科大学附属深圳宝安医院病理科	63	434	12.0	18.0
3	柳玉红	南方医科大学附属深圳宝安医院病理科	3	1	1.0	1.0
4	李晓鸣	南方医科大学附属深圳宝安医院病理科	2	0	0.0	0.0
5	邹桂华	南方医科大学附属深圳宝安医院病理科	2	0	0.0	0.0