Rev-erbβ基因敲除对肝癌HepG2细胞增殖和迁移侵袭的影响

• 作者: 夏海滨 赵俊丽 陈芳
• 来源期刊: 四川大学学报（医学版）
• 关键词: CRISPR/Cas9 HepG2细胞 Rev-erbβ 基因敲除 增殖 迁移
• 年，卷（期）: 2019,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 520-526
• 页数: 7页
• 语种: 中文

摘要

目的 探讨核受体Rev-erbβ基因敲除对肝癌HepG2细胞增殖和迁移的影响.方法 首先采用对靶向基因进行特定DNA修饰的CRISPR/Cas9基因组编辑技术构建Rev-erbβ基因敲除的HepG2细胞系.用Rev-erbβ打靶载体共转染到HepG2细胞,通过筛选、克隆化构建Rev-erbβ基因敲除HepG2细胞系,并采用PCR、测序和Western blot鉴定.以正常HepG2细胞为对照,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测Rev-erbβ基因敲除对肿瘤迁移、侵袭相关基因表达的影响,采用MTT、细胞划痕、Transwell等实验检测Rev-erbβ基因敲除对HepG2细胞增殖、迁移及侵袭的影响.结果 成功构建一株Rev-erbβ基因完全敲除单克隆细胞系(经PCR、测序和Westernblot鉴定),命名为HepG2 C5(Rev-erbβ-/-).qRT-PCR结果显示,Rev-erbβ基因敲除可以导致基质金属蛋白酶-2,-9基因(MMP2,MMP9)、细胞外基质蛋白1基因(ECM1)表达上调(P均＜0.05),细胞黏附相关基因E-钙黏蛋白基因(CDH1)下降(P=0.05);MTT、细胞划痕、Transwell实验显示,并且HepG2 C5比对照细胞有更强的增殖、迁移与侵袭能力(P＜0.05).结论 Rev-erbβ基因敲除可以改变HepG2细胞与迁移、黏附相关基因的表达,进而影响HepG2细胞增殖、迁移与侵袭能力.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈芳	安康学院现代农业与生物科技学院	21	82	6.0	7.0
7	夏海滨	陕西师范大学生命科学学院基因治疗研究室	45	117	6.0	9.0
11	赵俊丽	陕西师范大学生命科学学院基因治疗研究室	10	11	2.0	2.0