禽呼肠孤病毒σA基因对鸡胚成纤维细胞天然免疫相关基因转录水平的调控影响

• 作者: 张民秀 张艳芳 曾婷婷 王盛 罗思思 范晴 谢丽基 谢志勤 谢芝勋 邓显文 黄娇玲 黄莉
• 来源期刊: 中国兽医科学
• 学科: 农学
• 关键词: 禽呼肠孤病毒 σA基因 天然免疫相关基因 鸡胚成纤维细胞
• 年，卷（期）: 2019,（5）
• 所属期刊栏目: 预防兽医学
• 页码范围: 611-618
• 页数: 8页
• 分类号: S852.659.4
• 语种: 中文
• DOI: 10.16656/j.issn.1673-4696.2019.0086

摘要

为了明确禽呼肠孤病毒(Avian reovirus,ARV)σA基因对宿主天然免疫应答的影响,本研究利用实时荧光定量PCR方法检测pCAGEN-σA转染鸡胚成纤维细胞(DF1)后,不同时间点(转染后第3、6、12、24和36小时)DF1细胞中天然免疫相关基因,包括Toll样受体(TLRs)、MDA5、MAVS、MyD88、TRIF、IRF-3、IRF7、NF-κB、IFN-α、IFN-β、IL-6、IL-8、1FITM3、Mx1和OASL等基因的转录水平变化.结果,与空载体转染细胞相比,pCAGEN-σA转染细胞中上述这些天然免疫基因的mRNA水平出现不同程度变化(P＜0.05或P＜0.01).TLR3应对最快速,其mRNA水平在转染后第3小时和第6小时迅速上升,但9h后逐渐下降;MDA5和TLR7的mRNA水平,则分别在转染后第6小时和第12小时开始显著升高,并分别在转染后第12小时和第36小时达到峰值(P＜0.05或P＜0.01);TLR15的mRNA水平整体变化不明显.MyD88和MAVS的mRNA水平呈表达上调趋势;TRIF在转染后第6小时表达量迅速达到峰值(2.83倍),随后急速下降.NF-κB呈表达上调趋势;而IRF3/7的表达则被抑制.Ⅰ型干扰素(IFN-α和IFN-β)呈现相似的表达模式,在转染后第6小时和第24小时表达量增加,其他时间点均为表达量下降;IL-6和IL-8则表达上调,分别在转染后第9小时和第6小时达到峰值(P＜0.01).IFITM3、Mx1、OASL的mRNA水平也显著升高,均在转染后第12小时达到峰值(P＜0.01).上述试验结果表明,在DF-1细胞中过表达σA基因,能显著引起天然免疫相关基因的表达的变化,为进一步阐释ARV的分子致病机制和免疫应答机理奠定了基础.