基孔肯雅病毒感染性克隆的构建及鉴定

• 作者: 何燕华 唐海琳 彭浩然 徐铮昊 戚中田 罗正汉 赵兰娟 赵平
• 来源期刊: 国际病毒学杂志
• 关键词: 基孔肯雅病毒 Ross株 LR2006株 感染性克隆
• 年，卷（期）: 2019,（5）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 337-340
• 页数: 4页
• 字数: 2502字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1673-4092.2019.05.013

摘要

目的 构建基孔肯雅病毒(chikungunya virus,CHIKV)东中南非型Ross株及该型印度洋分支LR2006株的感染性克隆.方法 分别将CHIKV Ross株和LR2006株基因组分段合成,构建完整基因组的转录质粒,转录制备病毒基因组RNA,转染Vero细胞,收集培养上清,接种Vero细胞扩增病毒,用扩增的病毒感染Huh7细胞,检测病毒蛋白的表达,经滴鼻途径将106 PFU病毒接种给C57BL/6小鼠,观察小鼠的体重改变以及存活情况.结果 成功构建了2株CHIKV的全长基因组转录质粒,在RNA转染Vero细胞的上清中检测到感染性CHIKV.Ross株感染的5只小鼠在6天后体重下降(P<0.05),第11天小鼠全部死亡.LR2006株感染的5只小鼠仅1只死亡,且全部小鼠体重均无明显减轻.结论 成功构建CHIKV的Ross株和LR2006株感染性克隆,Ross株对C57BL/6小鼠致病性强于LR2006株.