猪伪狂犬病病毒野毒株与疫苗株荧光定量PCR检测方法的建立和应用

• 作者: 倪柏锋 周蕾 徐辉 柴娟 王雅婷 董建斐 虞一聪 谢荣辉 赵灵燕
• 来源期刊: 中国兽医科学
• 学科: 农学
• 关键词: 伪狂犬病病毒 荧光定量PCR
• 年，卷（期）: 2019,（11）
• 所属期刊栏目: 预防兽医学
• 页码范围: 1354-1360
• 页数: 7页
• 分类号: S852.659.1
• 语种: 中文
• DOI: 10.16656/j.issn.1673-4696.2019.0187

摘要

根据伪狂犬病病毒gD、gE基因序列设计2对引物及其对应的探针,通过对引物、探针浓度的优化,建立了猪伪狂犬病病毒野毒和减毒活疫苗株荧光定量PCR检测鉴别方法,并评价其特异性、敏感性和重复性.结果 显示,猪圆环病毒、猪瘟病毒、猪流行性乙型脑炎病毒、猪细小病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪博卡病毒、猪流行性腹泻病毒和猪传染性胃肠炎病毒均无扩增曲线.野毒株均出现gD和gE基因扩增曲线,而疫苗株只出现了gD基因扩增曲线,表明该检测方法具有良好的特异性.建立的gD和gE基因标准曲线Ct值和模板终浓度在1×108～1×10 copies/μL范围内均具有良好的线性关系,灵敏度均可达1×10 copies/μL.对39份猪组织样品进行检测,荧光定量PCR检出5份样品猪伪狂犬病病毒gD、gE阳性,表明这5份猪组织样品为猪伪狂犬病病毒野毒感染.常规PCR检出5份猪伪狂犬病病毒阳性,经测序为野毒感染,2种方法符合率为100％.本研究建立的荧光定量PCR可用于猪伪狂犬病病毒的快速检测和流行病学调查.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	周蕾		10	27	3.0	5.0
2	赵灵燕		31	103	6.0	8.0
3	徐辉		28	105	6.0	9.0
4	倪柏锋		15	67	5.0	8.0
5	王雅婷		3	5	1.0	2.0
6	柴娟		6	7	1.0	2.0
7	虞一聪		3	5	1.0	2.0
8	董建斐		1	0	0.0	0.0
9	谢荣辉		5	6	1.0	2.0