分子佐剂eda对巨型艾美耳球虫亚单位疫苗的影响

• 作者: 丁可欣 徐焘杰 殷光文 陈志 陈欢 黄志坚 黄潇航
• 来源期刊: 中国兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: eda EmIMPⅠ 分子佐剂 巨型艾美耳球虫
• 年，卷（期）: 2019,（2）
• 所属期刊栏目: 预防兽医学
• 页码范围: 239-243,259
• 页数: 6页
• 分类号: S852.7
• 语种: 中文
• DOI: 10.16303/j.cnki.1005-4545.2019.02.09

摘要

纤维连接蛋白外域A(fibronectin extra domain A,eda)可以作为一种佐剂,而免疫相关蛋白1(IMP Ⅰ)是巨型艾美耳球虫中的一种免疫保护抗原.本试验将eda基因和EmIMP Ⅰ基因连接,构建真核表达载体pVAX Ⅰ-eda-EmIMPⅠ和pVAXⅠ-EmIMPⅠ,对eda作为EmIMPⅠ的分子佐荆的功能进行研究.首先,根据本实验室保存的含eda-EmIMP Ⅰ与EmIMP Ⅰ的载体为模板进行PCR扩增目的片段,将目的片段分别连接到真核表达载体pVAX Ⅰ中,构建质粒pVAXⅠ-eda-EmIMPⅠ和pVAXⅠ-EmIMPⅠ,然后将质粒转入大肠杆菌感受态Trans1-T1中,大量提取质粒.将提取的质粒通过肌肉注射到鸡体内,进行免疫学试验,对疫苗的免疫效果进行评价.结果 显示:在ELISA检测中,eda佐剂组,IgG效价的D值最高,其抗体滴度为6 400,血清中IL-10含量明显多于其他组,IFN-y细胞因子的提升最高.eda佐剂组在卵囊计数方面,减少卵囊排出量仅次于空白组.肠道病变计分中,eda佐剂组计分仅次于空白组,对肠道保护效果最好.从增重来看,eda佐剂组也是攻虫组当中增重最多的一组.所以,从各项检测结果来看,eda佐剂组有明显的优势,EmIMP Ⅰ组从检测结果上看差于eda佐剂组,说明含eda佐剂能使EmIMPⅠ增强其免疫原性.