基于线粒体细胞色素C氧化酶I基因序列的细胞种属鉴别及细胞交叉污染分析

• 作者: 王云瑾 王名强 王革 陈汉泉 马超
• 来源期刊: 微生物学免疫学进展
• 学科: 生物学
• 关键词: 线粒体细胞色素C氧化酶I 基因条码 细胞基质 种属鉴别 交叉污染
• 年，卷（期）: 2019,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 44-47
• 页数: 4页
• 分类号: Q813.1+1
• 字数: 3082字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13309/j.cnki.pmi.2019.04.008

摘要

目的 建立一种快速、简便、敏感和特异的基于线粒体细胞色素C氧化酶I(cytochrome C oxidase subunit I,CoI)基因序列的细胞基质检测方法 ,用于细胞种属鉴别和不同种属间的细胞交叉污染分析.方法 ①提取非洲绿猴肾细胞(Vero细胞)、狗肾细胞(MDCK细胞)和牛肾细胞(MDBK细胞)基因组DNA,以PCR扩增相应细胞的线粒体CoI基因保守区的基因条码序列,将扩增产物经琼脂糖凝胶电泳检测其基因片段的大小,并与文献报道的来源于ATCC相应细胞系线粒体CoI基因保守区的基因条码序列片段大小进行对比,以确定细胞的种属类别;②用Vero细胞、MDCK细胞和MDBK细胞的线粒体CoI基因保守区的基因的特异性引物分别与相应细胞和其他不同种属的细胞的基因组DNA进行PCR扩增,检测方法的特异性;用不同浓度的细胞基因组DNA与相应细胞的线粒体CoI基因保守区的基因的特异性引物进行PCR扩增,检测方法的灵敏度;③以不同种属细胞的线粒体CoI基因保守区的基因的特异性引物分别与多种细胞混合液提取的细胞基因组DNA进行PCR扩增,检测细胞间的交叉污染.结果 Vero细胞、MDCK细胞及MDBK细胞线粒体CoI基因保守序列中的基因条码序列片段大小,与来源于ATCC相应细胞系线粒体CoI基因保守序列中的基因条码序列片段大小相符.该方法具备较好的特异性,检测灵敏度为1.0 ng/μL,不同种属间细胞的交叉污染可被检出.结论 该方法可有效地判断细胞的种属来源,亦可用于不同种属间细胞交叉污染的分析.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈汉泉	兰州生物制品研究所有限责任公司质量检定室甘肃省疫苗工程技术研究中心	10	14	2.0	3.0
2	王名强	兰州生物制品研究所有限责任公司质量检定室甘肃省疫苗工程技术研究中心	10	26	3.0	4.0
3	王革	兰州生物制品研究所有限责任公司质量检定室甘肃省疫苗工程技术研究中心	10	18	2.0	3.0
4	王云瑾	兰州生物制品研究所有限责任公司质量检定室甘肃省疫苗工程技术研究中心	4	10	1.0	3.0