miRNA-33对Hcy干预RAW264.7巨噬细胞衍生的泡沫细胞表达ABCA1/ABCG1的影响

• 作者: 代佩 冯高洁 宋晓苏 张秦风 李虹 王远 白瑞 秦卫伟 高奋 高宏伟
• 来源期刊: 中国病理生理杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 微小RNA-33 同型半胱氨酸 胆固醇逆转运 三磷酸腺苷结合盒转运体A1 三磷酸腺苷结合盒转运体G1
• 年，卷（期）: 2019,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 212-217
• 页数: 6页
• 分类号: R543.5|R363.2
• 字数: 4265字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-4718.2019.02.004

摘要

目的:研究同型半胱氨酸 (Hcy) 是否通过微小RNA-33 (miRNA-33) 抑制三磷酸腺苷结合盒转运体A1 (ABCA1) 和三磷酸腺苷结合盒转运体G1 (ABCG1) 的表达, 从而降低胆固醇逆转运 (RCT) 效率.方法:复制RAW264.7巨噬细胞经氧化型低密度脂蛋白 (ox-LDL) 诱导为泡沫细胞的模型, 油红O染色确定模型是否复制成功, 用LipofectamineTM2000将miRNA-33 mimics和miRNA-33 inhibitor分别转染入细胞内, 再给予5 mmol/L的Hcy干预24 h后进行实验;用油红O染色观察细胞内脂滴情况;real-time PCR和Western blot检测ABCA1和ABCG1的mRNA和蛋白表达水平;液体闪烁计数法检测细胞内胆固醇流出率;高效液相色谱分析细胞内胆固醇含量.结果: (1) 与空白对照组相比, miRNA-33 mimics组细胞内脂滴含量增加, ABCA1和ABCG1的mRNA和蛋白表达量降低 (P <0.05) , 细胞内胆固醇含量逐渐增加 (P <0.05) , 细胞内胆固醇流出率逐渐减少 (P <0.05) ; (2) 与空白对照组相比, miRNA-33 inhibitor组检测结果与miRNA-33 mimics组的结果相反, 差异具有统计学意义 (P <0.05) ; (3) 空白对照组、miRNA-33 mimics-NC组和miRNA-33 inhibitor-NC组3组间相比, 所有检测结果的差异均无统计学显著性.结论:Hcy可间接通过诱导miRNA-33表达而抑制ABCA1和ABCG1的蛋白表达, 降低RCT效率.