柔嫩艾美耳球虫穿孔素样蛋白基因的原核表达与亚细胞定位

• 作者: 刘保红 曲自刚 王文青 肖星星 蒋保余 蔡建平 许笑 马雪婷
• 来源期刊: 中国兽医科学
• 学科: 农学
• 关键词: 柔嫩艾美耳球虫 穿孔素样蛋白 mRNA水平 亚细胞定位
• 年，卷（期）: 2019,（11）
• 所属期刊栏目: 预防兽医学
• 页码范围: 1406-1414
• 页数: 9页
• 分类号: S852.723
• 语种: 中文
• DOI: 10.16656/j.issn.1673-4696.2019.0175

摘要

为了研究柔嫩艾美耳球虫(E.tenella)穿孔素样蛋白(EtPLP)在球虫感染中与宿主相互作用关系,首次成功获得EtPLP(1 932 bp)和EtPLP2(4 215 bp)2个目的基因.通过表达纯化得到2个大小分别为37和67ku的目的蛋白,Western-blot结果显示其反应原性良好.通过免疫荧光技术,观察到EtPLP定位在子孢子顶端.mRNA转录水平检测结果显示,EtPLP1在子孢子阶段的表达量最高,其次是第1代裂殖子阶段,EtPLPmRNA水平在第1代裂殖子阶段表达量最高,其次是第2代裂殖子阶段;它们在其他阶段表达量极低或不表达.结果 表明EtPLP和EtPLP2可能参与虫体入侵与选出宿主细胞,为EtPLPs蛋白功能研究奠定了基础.