马尾松PmWRKY164基因的克隆及耐低磷功能分析

• 作者: 尚先文 文晓鹏 李慧平 汤纬玮 王庆竹 范付华
• 来源期刊: 农业生物技术学报
• 学科: 农学
• 关键词: 马尾松 低磷胁迫 WRKY转录因子 功能分析
• 年，卷（期）: 2019,（6）
• 所属期刊栏目: 研究论文与报告
• 页码范围: 1016-1024
• 页数: 9页
• 分类号: S722.3+6|Q943
• 字数: 5624字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2019.06.007

摘要

WRKY转录因子在植物应答逆境胁迫中扮演了重要角色.本研究克隆了马尾松(Pinus massoniana)的Pm WRKY164基因(GenBank No.MH579749),该基因的cDNA全长1 977 bp,开放阅读框(ORF)1 164 bp,编码387个氨基酸,具有WRKYGQK七肽保守结构域和C2H2(C-X4-5-C-X23-HXH)锌指结构域,属于WRKY家族第Ⅱb类成员.系统进化树分析表明,PmWRKY 164与红豆杉(Taxus wallichiana var.chinensis,AEW91476.1)、欧洲云杉(Picea abies,ACA04888.1)的亲缘关系较近;分别以2种不同磷(phosphorus,P)浓度下胁迫处理的马尾松cDNA作为模板,对Pm WRKY164的时空表达进行分析,结果表明,Pm WRKY164在马尾松根茎叶中均有表达,叶中表达量最高,呈上调表达,与超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、过氧化物酶(peroxidase,POD)、酸性磷酸酶(acid phosphatase,Apase)3种酶的活性表达具有较高的相似性;构建pB WA(V)HS-Pm WRKY164植物过表达载体,经遗传转化获得20株Pm WRKY164过表达转基因植株.选取T1代3个转基因株系(Line-2,Line-3,Line-8)和野生型(wild type,WT)烟草株系,用4种不同浓度的Hogland营养液进行磷胁迫,结果表明,在P2低磷(营养液磷含量0.1mmol/L)胁迫下,除了丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量低于野生型之外,磷含量、Apase活性、POD活性及SOD活性在转基因烟草中均显著高于野生型(P＜0.05);而正常磷P3(1 mmol/L)及高磷P4 (10 mmol/L)条件下,转基因与野生型植株并无明显差异.本研究为进一步探讨PmWRKY164的功能,以及为马尾松耐低磷胁迫的分子机制提供新的信息与思路.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	文晓鹏	贵州大学贵州省农业生物工程重点实验室	65	806	14.0	25.0
2	范付华	贵州大学林学院	12	100	5.0	10.0
6	王庆竹	贵州大学贵州省农业生物工程重点实验室	2	4	1.0	2.0
10	李慧平	贵州大学贵州省农业生物工程重点实验室	2	4	1.0	2.0
11	尚先文	贵州大学林学院	1	0	0.0	0.0
12	汤纬玮	贵州大学贵州省农业生物工程重点实验室	1	0	0.0	0.0