miR-486-5p通过负向调控AMPK/Sirt1信号通路参与肝细胞性肝癌细胞增殖

• 作者: 柳德兵 申铭 郑建伟
• 来源期刊: 武汉大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 微小RNA-486-5p 肝细胞性肝癌 p-AMPK/Sirt1通路 细胞周期 细胞增殖
• 年，卷（期）: 2019,（5）
• 所属期刊栏目: 基础医学研究
• 页码范围: 694-701
• 页数: 8页
• 分类号: R735.7
• 语种: 中文
• DOI: 10.14188/j.1671-8852.2019.0058

摘要

目的:探究miR-486-5p在肝细胞性肝癌(HCC)中的变化及其调节HCC细胞系增殖的可能机制.方法:q-PCR法检测98例健康人血浆和87例HCC患者组织与血浆miR-486-Sp含量,并采用Pearson相关性分析其与甲胎蛋白(AFP)升高的相关性,同时检测人HCC癌细胞系SMMC-7721、Bel-7402、MHCC97、HepG2、Hep3B、Huh-7、MS751和正常肝细胞LO2细胞及转染0,25,50,100 μmol/L miR-486-5p类似物(miR-486-5p mimic) 24 h后LO2、MHCC97、HepG2和Huh-7细胞的miR-486-5p含量;CCK-8法检测转染miR-486-5p类似物2,12,24,48,72 h的LO2、MHCC97、HepG2和Huh-7细胞的增殖率;Western Blot检测CyclinD1、Cyclin E1、CDK4、CDK6、p-AMPK、AMPK和Sift1蛋白表达量;qPCR检测转染CCND1、CCNE、CDK4、CDK6 mRNA表达量.结果:HCC患者癌组织miR-486-5p含量明显低于癌旁组织,血浆中miR-486-5p含量明显低于正常人;HCC患者癌组织和血浆中miR-486-5p含量与血浆AFP含量呈显著负相关性,相关系数分别为-0.1554和-0.2228(P＜0.001);除Huh-7细胞外,人HCC癌细胞系SMMC-7721、Bel-7402、MHCC97、HepG2、Hep3B和MS751细胞中miR-486-5p含量明显低于LO2细胞(P＜0.05);相比于阴性对照类似物(NC)处理组,0至100 μmol/L的miR-486-5p类似物处理LO2和Huh-7细胞24 h组的miR-486-5p水平均没有明显的变化(P＞0.05),50μmol/L和100 μmol/L的miR-486-5p类似物处理24 h的MHCC97和HepG2细胞,相比于NC处理组,其miR-486-5p水平均显著增加(P＜0.05);miR-486-5p类似物处理LO2组的增殖率相比于NC和Control组无明显的变化.相比于NC和Control组,miR-486-5p类似物处理HepG2和MHCC97细胞24 h的增殖率相比于2h的显著降低,分别为(77.70±7.53)％和(86.61±1.08)％.且具有时间依赖性.而miR-486-5p类似物处理Huh-7细胞48 h组增殖率为(84.79±2.33)％,明显低于2h组;miR-486-Sp类似物转染HepG2和MHCC97细胞24 h的Cyclin D1、CyclinE、CDK6蛋白与mRNA表达量明显低于NC组(P＜0.05),HepG2的miR-486-5p类似物处理CDK4相比于NC组无明显变化(P＞0.05),MHCC97的miR-486-5p类似物组CDK4相比于NC组明显降低(P＜0.05).p-AMPK与Sirt1蛋白水平均明显低于NC组.结论:过表达miR-486-5p通过下调p-AMPK/Sirt1通路阻断HCC肿瘤细胞细胞周期,并抑制癌细胞增殖.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	申铭	华中科技大学同济医学院附属同济医院胆胰外科	38	145	8.0	10.0
2	柳德兵	武汉市红十字会医院普通外科	3	2	1.0	1.0
3	郑建伟	武汉市红十字会医院普通外科	1	2	1.0	1.0