白蜡虫泌蜡初期全长转录组测序及FAR在雌雄虫中蛋白表达分析

• 作者: 于淑惠 吴国星 朱家颖 杨斌 杨璞 赵遵岭 高熹
• 来源期刊: 云南农业大学学报（自然科学）
• 学科: 农学
• 关键词: 白蜡虫 白蜡合成基因 脂酰辅酶A还原酶 转录组测序 抗体制备 表达分析
• 年，卷（期）: 2019,（5）
• 所属期刊栏目: 动物科学
• 页码范围: 762-771
• 页数: 10页
• 分类号: Q78|S899.1
• 字数: 6325字
• 语种: 中文
• DOI: 10.12101/j.issn.1004-390X(n).201904043

摘要

[目的]了解白蜡虫[Ericerus pela (Chavannes)]二龄雄虫泌蜡初期的基因表达,鉴定参与白蜡合成的脂酰辅酶A还原酶(fatty acyl-CoA reductase,far)基因,并明确FAR在白蜡虫雌雄虫中的蛋白表达情况.[方法]采用三代全长转录组测序,分析白蜡虫二龄雄虫泌蜡初期表达的基因,筛选获得与白蜡虫泌蜡相关的far基因;对关注的1个FAR制备单克隆抗体,通过Western-blot分析该FAR在白蜡虫雌雄虫中的表达情况.[结果]对白蜡虫泌蜡初期的二龄雄虫成功进行了转录组测序,共获得81个far基因,筛选获得与白蜡虫泌蜡一致的6个基因,本研究关注的far基因命名为far3;成功制备了FAR3的单克隆抗体,通过单克隆抗体分析了FAR3在白蜡虫雌雄虫中的表达情况,证实FAR3在二龄雄虫中大量表达,在雌虫中有微量表达.[结论]本研究通过对泌蜡初期的白蜡虫二龄雄虫进行三代全长转录组测序获得了与白蜡虫泌蜡相关的far基因;通过制备的FAR3单克隆抗体证实了FAR3在二龄雄虫分泌白蜡期高量表达,这为白蜡虫其他far基因功能研究以及探索白蜡虫泌蜡分子机理奠定了基础.