过表达柠条锦鸡儿CkRNF185基因减弱拟南芥对渗透胁迫的耐受性

• 作者: 于秀敏 岳文冉 李国婧 杨杞 王瑞刚 王茜 韩晓东
• 来源期刊: 植物生理学报
• 关键词: E3泛素连接酶 柠条锦鸡儿 CkRNF185 渗透胁迫 拟南芥
• 年，卷（期）: 2019,（4）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 493-502
• 页数: 10页
• 语种: 中文
• DOI: 10.13592/j.cnki.ppj.2018.0457

摘要

RING (really interesting new gene)型E3泛素连接酶在植物逆境胁迫和生长发育过程中起关键作用.本研究利用RACE技术从柠条锦鸡儿中克隆得到一个RING型E3泛素连接酶基因CkRNF185(Caragana korshinskii RING-finger 185),其cDNA序列全长1 112 bp,包含了696 bp的开放阅读框,编码232个氨基酸.实时荧光定量PCR检测发现,kRNF185基因的表达受NaCl和脱水处理的诱导.同时构建pCanG-CkRNF185过表达载体并转化野生型拟南芥,得到转基因拟南芥过表达纯合体株系.通过对转基因拟南芥的研究,发现在甘露醇处理条件下转CkRNF185植物植株变小且叶片提前变黄坏死,叶绿素和脯氨酸含量皆降低.利用体外泛素化实验对Ck-RNF185进行检测发现该蛋白具有E3泛素连接酶活性.这些实验结果表明过表达E3泛素连接酶编码基因Ck-RNF185降低了拟南芥对渗透胁迫的耐受性.