PEG介导黄曲霉菌的遗传转化体系

• 作者: 吴昌学 周建奖 杨碧 江银辉
• 来源期刊: 贵州医科大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 黄曲霉菌 吡啶磺胺素 PEG介导 原生质体 遗传转化
• 年，卷（期）: 2019,（12）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 1390-1394
• 页数: 5页
• 分类号: R379.6
• 字数: 3451字
• 语种: 中文
• DOI: 10.19367/j.cnki.1000-2707.2019.12.005

摘要

目的:以吡啶硫胺抗性基因(ptrA)为筛选标记基因,建立黄曲菌遗传转化体系.方法:通过黄曲霉菌对潮霉素B(Hyg)、新霉素(G418)和嘧啶磺胺素(PT)的敏感性实验获得适合黄曲霉菌遗传转化筛选抗生素,用酶解的方法获得黄曲霉菌的原生质体;采用聚乙二醇(PEG)介导黄曲霉菌原生质体转化法,将携带ptrA的质粒pPTRI整合到黄曲菌株LD-F基因组DNA中,随机挑选7个转化子,通过聚合酶链反应(PCR)方法进行检测,验证ptrA是否整合到黄曲菌基因组DNA中.结果:0.2 mg/L PT可以完全抑制黄曲霉菌的菌丝生长,1％溶壁酶+1％纤维素酶+1％蜗牛酶处理黄曲霉菌丝2h可得到大量的原生质体;PCR检测结果显示,质粒pPTRI能够成功整合到黄曲菌基因组.结论:以PT为抗性筛选,建立PEG介导黄曲霉菌的遗传转化体系.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	周建奖	贵州医科大学地方病与少数民族疾病教育部重点实验室	7	10	2.0	3.0
2	吴昌学		2	13	1.0	2.0
3	江银辉		1	0	0.0	0.0
4	杨碧		1	0	0.0	0.0