柔嫩艾美耳球虫NADP特异性谷氨酸脱氢酶特性分析

• 作者: 刘桂玲 朱顺海 李志行 王璐 董辉 赵其平 赵焕之 韩红玉 黄兵
• 来源期刊: 中国兽医科学
• 学科: 农学
• 关键词: 柔嫩艾美耳球虫 NADP特异性谷氨酸脱氢酶 差异表达 耐药性
• 年，卷（期）: 2019,（10）
• 所属期刊栏目: 基础兽医学
• 页码范围: 1315-1323
• 页数: 9页
• 分类号: S852.723
• 语种: 中文
• DOI: 10.16656/j.issn.1673-4696.2019.0180

摘要

为了研究柔嫩艾美耳球虫NADP特异性谷氨酸脱氢酶(EtNADP-GDH)的分子特性,对该基因进行了克隆和生物信息学分析,利用间接免疫荧光定位、体外入侵抑制、实时荧光定量PCR、Western-blot和体外酶活性检测等方法分析其生物学特性.结果 显示,成功获得了EtNADP-GDH基因,该基因编码的蛋白富含包括NAD结合位点在内的多种功能位点.该蛋白主要分布在虫体的表面和细胞质中,抗rEtNADP-GDH多克隆抗体能抑制子孢子入侵DF-1细胞,抑制率约为45％,表明其参与了虫体入侵宿主细胞.荧光定量PCR结果显示,该基因在未孢子化卵囊阶段的转录水平最高;转录、翻译水平分析发现,与敏感株相比,2个耐药株(地克珠利耐药株和马杜拉霉素耐药株)中EtNADP-GDH的转录水平显著提高,而翻译水平无明显差异;酶活性分析结果显示,耐药株和敏感株差异不明显.结果 表明,该蛋白可能对虫体在宿主细胞内的生长发育起作用并参与了子孢子入侵宿主细胞的过程.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王璐	中国农业科学院上海兽医研究所	33	199	8.0	13.0
2	赵其平	中国农业科学院上海兽医研究所	29	282	10.0	16.0
3	黄兵	中国农业科学院上海兽医研究所	43	485	12.0	20.0
4	董辉	中国农业科学院上海兽医研究所	15	91	6.0	9.0
5	韩红玉	中国农业科学院上海兽医研究所	17	147	6.0	12.0
6	朱顺海	中国农业科学院上海兽医研究所	11	40	4.0	6.0
7	刘桂玲	中国农业科学院上海兽医研究所	1	0	0.0	0.0
8	赵焕之	中国农业科学院上海兽医研究所	1	0	0.0	0.0
9	李志行	中国农业科学院上海兽医研究所	1	0	0.0	0.0