基于颜色判定的环介导等温扩增检测生殖支原体的研究

• 作者: 冉梦龙 周梦诗 张明瑞 徐娟 李睿 赵飞 龚杰
• 来源期刊: 中国病原生物学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 生殖支原体 环介导等温扩增技术 分子诊断 临床检测
• 年，卷（期）: 2019,（11）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1268-1272
• 页数: 5页
• 分类号: R375
• 语种: 中文
• DOI: 10.13350/j.cjpb.191106

摘要

目的 建立一种基于颜色判定的快速、灵敏、简便的检测生殖支原体(MG)感染的环介导等温扩增(LAMP)方法.方法 使用PrimerExplorer V5软件依据gap基因保守区域设计4条特异性MG等温扩增引物,通过优化体系dNTPs、MgSO4浓度,建立一种基于羟基萘酚蓝(HNB)作为结果判读指示剂的MG等温扩增方法,进行灵敏度、特异性检测并与普通PCR比较;对30份性病门诊病例标本进行LAMP、RT-PCR和普通PCR检测,并进行比较分析.结果 建立的LAMP方法对8种常见支原体以及8种泌尿生殖道常见病原菌扩增均为阴性,特异性度为100％.对于MG ATCC 33530标准菌株核酸的检测限约为102 copies,与MG普通PCR一致,比MGRT-PCR检测限(10 copies)低一个数量级.30份临床标本使用LAMP、普通PCR和RT-PCR方法的MG阳性检出率分别为16.7％,16.7％和20.0％.结论 建立的MG LAMP检测方法灵敏、特异且操作简便,可在基层推广应用.