慢病毒载体CV072介导的Mfn2过表达抑制肝星状细胞活化

• 作者: 刘凌 朱含章 沈伟敏 葛珂 贾长库
• 来源期刊: 中国病理生理杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 线粒体融合蛋白2 肝纤维化 肝星状细胞 细胞凋亡 TGF-β1/Smad信号通路
• 年，卷（期）: 2019,（6）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1112-1117
• 页数: 6页
• 分类号: R329.21|R575.2
• 字数: 3965字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-4718.2019.06.024

摘要

目的:构建携带线粒体融合蛋白2(Mfn2)基因的慢病毒载体,并探讨Mfn2过表达对大鼠肝星状细胞活化的抑制作用及其减少肝纤维化相关因子生成的机制.方法:构建含Mfn2的慢病毒过表达载体CV072-pC-MV-Mfn2-EGFP,转染肝星状细胞;荧光显微镜下观察细胞中绿色荧光蛋白的表达及转染效率;RT-qPCR和Western blot法检测转染后细胞中Mfn2的mRNA和蛋白表达水平;Western blot检测Bax、Bcl-2、cleaved caspase-3、α-SMA、TGF-β1、Smad2和Smad3的水平;ELISA检测Ⅰ、Ⅲ和Ⅳ型胶原蛋白水平.结果:与各对照组相比,慢病毒过表达载体CV072-pCMV-Mfn2-EGFP转染后,细胞促凋亡蛋白表达增多,TGF-β1/Smad通路蛋白TGF-β1、p-Smad和p-Smad3的蛋白水平均降低,纤维化相关蛋白 α-SMA、I型胶原蛋白、Ⅲ型胶原蛋白和IV型胶原蛋白的水平降低(P<0.01).结论:转染慢病毒过表达载体CV072-pCMV-Mfn2-EGFP在体外可有效抑制肝星状细胞活化,并可能通过抑制TGF-β1/Smad通路减少肝纤维化相关因子的生成.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	贾长库	浙江大学医学院附属杭州市第一人民医院肝胆胰外科	8	27	2.0	5.0
2	刘凌	浙江大学医学院附属杭州市第一人民医院肝胆胰外科	4	0	0.0	0.0
3	朱含章	浙江大学医学院附属杭州市第一人民医院肝胆胰外科	3	0	0.0	0.0
4	葛珂	浙江大学医学院附属杭州市第一人民医院肝胆胰外科	2	0	0.0	0.0
5	沈伟敏	浙江大学医学院附属杭州市第一人民医院肝胆胰外科	2	0	0.0	0.0