MiR-873对缺氧复氧诱导的心肌细胞凋亡的影响及其机制

• 作者: 周云洁 孙治霞 张会超
• 来源期刊: 中南大学学报（医学版）
• 关键词: 微小RNA-873 心肌细胞 缺氧/复氧 凋亡 egl-9家庭缺氧诱导因子3
• 年，卷（期）: 2019,（8）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 857-863
• 页数: 7页
• 字数: 4032字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11817/j.issn.1672-7347.2019.180422

摘要

目的:探讨微小RNA(micro RNA,miR)-873在心肌细胞缺氧复氧(hypoxia reoxygenation,H/R)损伤中的作用及其相关机制.方法:采用体外培养大鼠H9c2心肌细胞构建H/R模型,并转染miR-873模拟物(mimic),实验分为对照组、H/R组、阴性对照组及miR-873 mimic组.Real-time PCR检测各组miR-873的表达水平;蛋白质印迹法检测egl-9家庭缺氧诱导因子3(egl-9 family hypoxia inducible factor 3,Egln3)、B淋巴细胞瘤-2基因(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)和Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2 associated X protein,Bax)的表达水平;ELISA试剂盒以及天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-3(cysteine-containing,aspartate-specific proteases-3,caspase-3)活性检测试剂盒分别用来检测细胞凋亡和caspase-3活性;采用双荧光素酶报告基因系统检测miR-873对Egln3的作用靶点,并将实验分为阴性对照组、携带野生型(wild type,WT)报告基因的Egln33'-非编码区(3'-untranslated regions,3'-UTR)组(WT组)和携带突变型(mutant type,MUT)报告基因的Egln33'-UTR组(MUT组).为进一步检测Egln3对miR-873 mimic作用的影响,实验构建了Egln3过表达细胞,并将其分为H/R组、H/R+miR-873 mimic组、H/R+pcDNA3-Egln3(pcEgln3)组和H/R+miR-873 mimic+pcEgln3组.结果:与对照组相比,H/R组中miR-873表达显著下调,差异有统计学意义(P<0.05).与H/R组相比,miR-873 mimic组中H9c2心肌细胞凋亡和caspase-3活性下降,Bax/Bcl-2比值下降,差异均有统计学意义(均P<0.05);荧光素酶活性检测结果表明:与阴性对照组相比,WT组荧光素酶活性显著下调,差异有统计学意义(P<0.05),而MUT组荧光素酶活性无明显变化,差异无统计学意义(P>0.05).过表达实验结果表明:与H/R组相比,miR-873 mimic组细胞凋亡和Bax/Bcl-2比值均显著下降(均P<0.05);与miR-873 mimic组相比较,H/R+pcEgln3组和H/R+miR-873 mimic+pcEgln3组细胞凋亡和Bax/Bcl-2比值显著上调,差异均有统计学意义(均P<0.05).结论:MiR-873通过靶向作用于Egln3而抑制H/R心肌细胞凋亡.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	周云洁	河南中医药大学第二附属医院研究生工作办公室	22	25	2.0	3.0
2	孙治霞	河南中医药大学第二附属医院重症监护室	1	1	1.0	1.0