H5亚型禽流感病毒样颗粒的制备及其免疫原性的初步研究

• 作者: 刘玉良 李建峰 杨林 王乃迪 王传彬 石玉祥 蒋菲 高晓艺
• 来源期刊: 中国兽医科学
• 学科: 农学
• 关键词: 2.3.4.4分支 H5亚型禽流感 病毒样颗粒 杆状病毒表达系统
• 年，卷（期）: 2019,（8）
• 所属期刊栏目: 预防兽医学
• 页码范围: 961-968
• 页数: 8页
• 分类号: S852659.5
• 语种: 中文
• DOI: 10.16656/j.issn.1673-4696.2019.0109

摘要

本研究采用RT-PCR方法扩增2.3.4.4分支H5亚型高致病性禽流感病毒HA、NA和M1基因,亚克隆至穿梭载体pFastBacl,然后转化至DH10Bac感受态细胞,筛选重组杆粒.将阳性重组杆粒共转染至sf9昆虫细胞,构建病毒样颗粒(VLPs),通过血凝和血凝抑制试验、透射电镜、Western-blot等方法鉴定.利用蔗糖密度梯度超速离心浓缩纯化VLPs,选择不同剂量VLPs免疫6周龄SPF鸡,评价其免疫原性.结果 显示,成功构建重组杆粒,转染的sf9细胞出现皱缩、变形、融合、囊泡化等特征性病变;在细胞盲传3代后,含有VLPs的细胞上清液的血凝效价可达1∶27;Western-blot证实3个目的蛋白均成功表达;透射电镜观察结果表明,VLPs与天然禽流感病毒颗粒具有相似的形态特征;动物试验结果表明,二免后2周,血清抗体效价最高可达到1∶210,抗体亚型主要为IgG1.本研究首次成功构建了2.3.4.4分支H5亚型禽流感VLPs,为开发新型、安全、高效的H5亚型禽流感疫苗奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王传彬		29	161	8.0	12.0
2	刘玉良		16	63	5.0	7.0
3	杨林		43	239	9.0	14.0
4	蒋菲		5	0	0.0	0.0
5	高晓艺		2	0	0.0	0.0
6	王乃迪		1	0	0.0	0.0
7	李建峰		1	0	0.0	0.0
8	石玉祥		2	0	0.0	0.0