PD-S15融合蛋白体外特异性靶向PD-1分子并快速扩增NK/T细胞

• 作者: 张放 李铁鹏 杜雪相 王瑶 王阿香 高全立
• 来源期刊: 中国肿瘤生物治疗杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 程序性死亡受体1 白细胞介素-15/白细胞介素-15受体 PD-S15融合蛋白 过继细胞治疗 抗原特异性T细胞
• 年，卷（期）: 2019,（4）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 389-395
• 页数: 7页
• 分类号: R392.33
• 语种: 中文
• DOI: 10.3872/j.issn.1007-385x.2019.04.004

摘要

目的:探讨anti-PD-1 (scFv) /IL-15/IL-15Rα-sushi (简称PD-S15) 融合蛋白体外特异性结合PD-1的能力及其对NK/T细胞增殖能力的影响.方法:化学合成人anti-PD-1 (scFv) 基因和人IL-15/IL-15Rα-sushi融合基因, 经过酶切连接构建重组表达质粒pUC57-PD-S15, 用LipofectamineTM2000瞬时转染HEK293T细胞, 收获细胞培养液上清, 用Wb法检测细胞培养液上清中PDS15融合蛋白的表达;用不同配比的PD-S15/X-VIVOTM15培养液对PBMC和TIL分别诱导培养后, 用流式细胞术检测PD-S15融合蛋白体外特异性结合PD-1的能力和对PBMC增殖及CD3+CD8+、CD3+CD4+、CD3-CD56+各细胞亚群比例的影响;用细胞计数法检测PD-S15融合蛋白对TIL增殖能力的影响.结果:pUC57-PD-S15表达质粒经双酶切和测序验证构建成功并成功转染HEK293T细胞, 目标蛋白相对分子质量大约为55 000, 符合预期.PD-S15融合蛋白体外具有PD-1特异性结合能力 (P<0.05) 及NK/T细胞活化增殖能力 (P<0.05);与经典TIL培养方案相比, PD-S15培养方案体外活化扩增T细胞的能力更强 (P<0.01) .结论:PD-S15融合蛋白体外能够特异性靶向PD-1分子并快速扩增NK/T细胞, 为后续从肿瘤组织内或外周血中选择性扩增CD8+PD-1+抗原特异性T细胞奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王瑶	郑州大学附属肿瘤医院暨河南省肿瘤医院生物免疫治疗中心	9	18	2.0	4.0
2	高全立		32	75	5.0	6.0
3	王阿香	郑州大学附属肿瘤医院暨河南省肿瘤医院生物免疫治疗中心	5	2	1.0	1.0
4	杜雪相	郑州大学附属肿瘤医院暨河南省肿瘤医院生物免疫治疗中心	2	0	0.0	0.0
5	李铁鹏	郑州大学附属肿瘤医院暨河南省肿瘤医院生物免疫治疗中心	2	0	0.0	0.0
6	张放	郑州大学附属肿瘤医院暨河南省肿瘤医院生物免疫治疗中心	1	0	0.0	0.0