基于NF-κB通路的芒果苷干预脂多糖诱导的细胞炎症作用机制研究

• 作者: 周瑞 唐志书 宋忠兴 李蕊萍 王瑞成 雷莉妍
• 来源期刊: 中国中西医结合杂志
• 关键词: 芒果苷 脂多糖 炎症 核因子κB通路
• 年，卷（期）: 2019,（5）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 597-602
• 页数: 6页
• 语种: 中文
• DOI: 10.7661/j.cjim.20190116.096

摘要

目的 研究芒果苷对小鼠巨噬细胞RAW 264.7的保护作用,并探讨其可能的作用机制.方法 采用脂多糖(LPS)诱导RAW 264.7细胞炎症模型.实验分四步:(1)细胞存活率实验分5组,即:空白组、LPS组、LPS+不同浓度(50、100、150 μg/mL)芒果苷组.MFT法检测细胞存活率.(2)一氧化氮(NO)、白介素1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)及白介素6(IL-6)分泌实验分6组,即:空白组、LPS组、LPS和不同浓度芒果苷(50、100、150 μg/mL)组、LPS+BAY 11-7082[核因子κB(NF-κB)抑制剂]组.Griess法检测NO分泌量,ELISA法检测IL-1β、TNF-α及IL-6分泌量.(3)诱导型一氧化氮合酶(iNOS)与环氧化酶-2(COX-2)mRNA及蛋白表达实验分组同细胞存活率实验.实时荧光定量PCR检测iNOS及COX-2 mRNA水平变化,Western blot检测iNOS及COX-2蛋白表达水平.(4)细胞质、细胞核中NF-κB表达实验分3组,即:空白组、LPS组、LPS+ 150 μg/mL(终末浓度)芒果苷共处理组,Western blot检测细胞质、细胞核中NF-κB p65蛋白表达量.结果 (1)与空白组比较,LPS组显著降低RAW264.7细胞存活率(P＜0.05);与LPS组比较,50～150 μg/mL芒果苷预处理对RAW264.7细胞增殖无显著影响(P＞0.05).(2)与空白组比较,LPS组NO、IL-1β、TNF-α、IL-6分泌量显著升高(P＜0.05);与LPS组比较,除50 μg/mL芒果苷预处理组NO、TNF-α分泌量无显著变化外(P＞0.05),其余各组NO、IL-1β、TNF-α、IL-6分泌量均显著降低(P＜0.05).(3)与空白组比较,LPS组iNOS、COX-2 mRNA及蛋白表达量均显著升高(P＜0.05);与LPS组比较,50～150 μg/mL芒果苷预处理组iNOS、COX-2 mRNA及蛋白表达显著下降(P＜0.05).(4)与空白组比较,LPS组细胞质中NF-κB p65蛋白量减少,细胞核中则增多(P＜0.05);与LPS组比较,150 iμg/mL芒果苷预处理组细胞质中NF-κB p65蛋白量升高,细胞核中蛋白量减少(P＜0.05).结论 芒果苷可能通过抑制NF-κB信号通路,而抑制iNOS、COX-2表达及相关炎症因子的分泌,干预LPS诱导的RAW264.7细胞炎症.