橙皮素通过抑制钙超载减轻低氧/复氧诱导的心肌H9c2细胞凋亡

• 作者: 吉晔楠 张妞妞 曾先燕 王文丽 贺忠梅
• 来源期刊: 中国病理生理杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 橙皮素 缺血再灌注损伤 细胞凋亡 钙超载 线粒体膜电位
• 年，卷（期）: 2019,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 873-880
• 页数: 8页
• 分类号: R363.2|R541
• 字数: 4977字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-4718.2019.05.016

摘要

目的:本研究旨在探讨橙皮素对低氧/复氧(hypoxia/reoxygenation,H/R)诱导的心肌H9c2细胞凋亡的影响及其可能机制.方法:建立心肌H9c2细胞H/R模型,使用橙皮素进行预处理,利用CCK-8和乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)试剂盒分别测定细胞活力和损伤情况;Hoechst 33258染色和流式细胞术检测细胞凋亡情况;采用Fluo-3AM孵育后观察细胞内的钙离子荧光强度;细胞Ca 2+-ATP酶活性与三磷酸腺苷(adenosine triphosphate,ATP)水平测定利用相应的ELISA试剂盒;利用JC-1染色检测线粒体膜电位;采用Western blot测定Bcl-2、Bax和细胞色素C(cytochrome C,Cyt-C)的蛋白表达水平.结果:橙皮素预处理可明显逆转H/R所致心肌H9c2细胞活力降低,并且减少细胞的凋亡率,降低细胞内钙离子的荧光强度,提高细胞Ca 2+-ATP酶活性,抑制线粒体膜电位去极化并提升ATP的水平(P<0.05),同时抑制Cyt-C蛋白从线粒体释放入胞浆并增加线粒体凋亡相关蛋白Bcl-2/Bax的比值(P<0.05);而给予钙离子拮抗剂尼莫地平后,与H/R组相比,线粒体膜电位去极化程度减轻,ATP获得提升并且线粒体凋亡相关蛋白表达降低(P<0.05).结论:橙皮素可抑制H/R诱导的心肌H9c2细胞凋亡,其机制可能与减轻钙超载从而改善线粒体功能有关.