人CD4+CD25-CD45RA+T细胞和CD4+CD25-T细胞诱导获得iTreg细胞的方法学研究

• 作者: 古鉴 吕凌 干晓杰 张少鹏 鞠峥 高骥
• 来源期刊: 中国免疫学杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: iTreg CD4+CD25-CD45RA+T细胞 CD4+CD25-T细胞 GVHD
• 年，卷（期）: 2019,（11）
• 所属期刊栏目: 免疫学技术与方法
• 页码范围: 1341-1347
• 页数: 7页
• 分类号: Q392.3
• 字数: 4216字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-484X.2019.11.012

摘要

目的:分析比较CD4+CD25-CD45RA+T细胞和CD4+CD25-T细胞在普通/炎性(加入IL-1β和IL-6)条件下,由TGF-β、IL-2和CD3/CD28磁珠共刺激诱导生成iTreg细胞的效率,并对比各组iTreg细胞相关蛋白和细胞因子表达水平变化及其免疫抑制能力的差异.方法:通过Ficoll细胞分离液分离出淋巴细胞,利用MACS分选机,结合CD4阴选磁珠筛出CD4阳性的T细胞,最后再提取其中CD45RA+和CD25-T细胞.体外实验中,在普通/炎性条件下诱导iTreg生成,3、6 d通过流式观察各组iTreg细胞的诱导情况及相关分子的表达变化趋势.体内实验分为:CD4+CD25-CD45RA+T细胞诱导的iTreg组、CD4+CD25-T细胞诱导的iTreg组和空白对照组,通过观察iTreg对GVHD小鼠模型的免疫调节,分析其免疫抑制能力的差异.结果:CD4+CD25-CD45RA+T细胞组和CD4+CD25-T细胞组普通条件下iTreg产率分别为(96.00±0.21)％和(60.23±0.50)％,炎性环境下为(81.97±1.29)％和(56.80±0.43)％,前者都显著高于后者(P<0.001).各组iTreg细胞中CTLA-4、TGF-β和IL-10的表达未见明显差异,而炎性因子IL-2、IL-17前者均低于后者(P<0.001),前者IFN-γ也低于后者(P<0.05).体内实验表明iTreg均具有免疫调节能力,但CD4+CD25-CD45RA+T细胞组诱导的iTreg能力强于后者.结论:CD4+CD25-CD45RA+T细胞组和CD4+CD25-T细胞组都可以成功诱导iTreg细胞,但是前者在普通和炎性微环境下诱导效率高于后者,免疫调节能力也优于后者.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	吕凌	南京医科大学第一附属医院肝胆中心	29	114	7.0	8.0
2	古鉴	南京医科大学第一附属医院肝胆中心	3	9	1.0	3.0
3	高骥	南京医科大学第一附属医院肝胆中心	3	17	2.0	3.0
4	张少鹏	南京医科大学第一附属医院肝胆中心	2	2	1.0	1.0
5	干晓杰	南京医科大学第一附属医院肝胆中心	2	13	1.0	2.0
6	鞠峥	南京医科大学第一附属医院肝胆中心	1	0	0.0	0.0