茶树CsANS基因的克隆及在转基因烟草中的功能分析

• 作者: 吕立堂 赵德刚 齐勇
• 来源期刊: 农业生物技术学报
• 学科: 农学
• 关键词: 茶树花青素合成酶(CsANS) 烟草 原花青素 黄烷-3-醇
• 年，卷（期）: 2019,（4）
• 所属期刊栏目: 研究论文与报告
• 页码范围: 636-644
• 页数: 9页
• 分类号: S-3|Q812
• 字数: 6985字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2019.04.007

摘要

花青素合成酶(anthocyanidin synthase,ANS)是合成植物花青素末端的重要催化酶,能够使无色花青素催化为有色花青素.本研究以茶树全长转录组测序数据为依据,利用反转录PCR(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)克隆了编码茶树(Camellia sinensis)ANS基因的cDNA序列(GenBank No.AY830416),编码区全长1 068 bp,编码355个氨基酸.构建载体pSH-CsANS,利用农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)侵染烟草(icotiana tabacun)进行遗传转化,组织培养获得35株转基因植株.选取3个经PCR验证的阳性烟草株系TP-1、TP-2和TP-4进行基因表达以及花青素和原花青素含量分析.qRT-PCR分析显示,转基因烟草植株中原花青素生物合成途径基因查儿酮异构酶(chalcone isomerase,CHI)、黄烷酮-3-羟化酶((2S)-flavanone 3-hydroaylase,F3H)和二羟黄酮醇还原酶(dihydroflavonol4-reductase,DFR)表达上调,黄酮醇合成酶(flavonol synthase,FLS)基因表达下调.结果 表明,超量表达茶树CsANS基因能够促进烟草花青素的合成,花青素含量比野生型提高45％左右.而且,超量表达CsANS基因能增加原花青素合成前提物质黄烷-3-醇含量,使转基因植株中原花青素含量比野生型升高34％左右.本研究结果为进一步对该基因的表达规律和功能分析提供理论基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	吕立堂		18	79	5.0	8.0