人白介素10荧光定量PCR检测方法的建立及其在糖尿病肾病中的表达研究

• 作者: 倪文娟 冷小敏 刘云 岳芳芳 师晶晶 曹东东 郭明好 马东红
• 来源期刊: 现代检验医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 白介素10 实时荧光定量PCR 糖尿病肾病
• 年，卷（期）: 2019,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 11-14
• 页数: 4页
• 分类号: Q503|R587.2
• 字数: 3118字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-7414.2019.04.003

摘要

目的 建立一种稳定、灵敏的人白介素-10(IL-10)荧光定量PCR的检测方法,比较白介素10在糖尿病肾病组和对照组中的表达差异.方法 取糖尿病肾病Ⅳ期患者的外周静脉血淋巴细胞RNA标本,主要从模板浓度、引物筛选两方面进行探索,建立稳定、灵敏的实验方法;将建立的实验方法用于比较33例糖尿病肾病患者和35例正常健康组中血液白介素10的表达差异.结果 ①将475ng的总RNA逆转录成cDNA模板进行稀释,当模板浓度稀释范围在103倍以内,扩增引物为F:5'GTGATGCCCCAAGCTGAGA-3’,R:5’-CACGGCCTTGCTCTTGTTTT-3'时可以获得白介素10荧光定量PCR检测的最佳条件.②与对照组相比,糖尿病肾病组患者外周血白介素10的表达水平明显下调(糖尿病肾病组16.21±1.84 vs对照组14.39±1.14),差异有统计学意义(t=7.049,P＜0.01).结论 该研究建立了检测白介素10的稳定的荧光定量PCR方法;应用该检测方法发现,白介素10在糖尿病肾病组中的表达明显下降,为白介素10在糖尿病肾病中的功能研究和临床检测提供参考和借鉴.