山羊副流感病毒3型通过Caspase途径诱导气管上皮细胞凋亡

• 作者: 主性 刘茂军 孙敏 嵇辛勤 廖政 张纹纹 李基棕 李文良 杨蕾蕾 毛立 肖芳 钟纯燕
• 来源期刊: 畜牧兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 山羊副流感病毒3型 细胞凋亡 气管上皮细胞 Caspase
• 年，卷（期）: 2019,（10）
• 所属期刊栏目: 预防兽医
• 页码范围: 2061-2069
• 页数: 9页
• 分类号: S852.659.5|S852.33
• 字数: 5140字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11843/j.issn.0366-6964.2019.10.012

摘要

旨在揭示山羊副流感病毒3型(CPIV3)感染气管上皮细胞后是否可诱导细胞发生凋亡,并对细胞凋亡的信号通路进行初步探究.本研究将CPIV3病毒液接种气管上皮细胞,在12、24、36、48、72和96h收集培养物上清检测病毒增殖滴度;通过形态学观察CPIV3诱导气管上皮细胞病变(CPE)情况;采用Annexin V-FITC/PI双染细胞凋亡检测试剂盒和Caspase-3、Caspase-8和Caspase-9活性检测试剂盒检测凋亡水平及相关指标;荧光定量PCR检测细胞凋亡分子mRNA表达水平;Western blot分析激活型Caspase-3蛋白表达变化情况.结果 显示,CPIV3在气管上皮细胞中的增殖呈上升趋势,96 h能达到104.50TCID50·mL-1;形态学观察发现,病毒接种后48 h出现细胞收缩变圆、脱落等CPE现象;流式细胞术检测及Caspase活性检测表明,感染组细胞出现细胞凋亡,48 h后细胞凋亡率达19.66％,且Caspase-3、Caspase-8和Caspase-9活性随着时间延长逐渐升高;死亡受体凋亡途径和线粒体凋亡途径细胞凋亡因子mRNA表达上调.Western blot分析揭示,激活型Caspase-3蛋白在病毒感染过程中被活化.本研究证实CPIV3感染可诱导气管上皮细胞凋亡,且Caspase途径在病毒诱导细胞凋亡的过程中发挥重要作用.