微小RNA-380-5p在宫颈癌组织及细胞中的表达及其通过下调RHOA抑制C33A细胞的增殖和迁移

• 作者: 姜鹍 杨长群 熊国平 谭照平 韩炜珍 颜琳
• 来源期刊: 中国肿瘤生物治疗杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 微小RNA-380-5p 宫颈癌 Ras同源基因家族成员A 增殖 迁移
• 年，卷（期）: 2019,（1）
• 所属期刊栏目: 临床研究
• 页码范围: 85-89
• 页数: 5页
• 分类号: R737.33|R730.2
• 语种: 中文
• DOI: 10.3872/j.issn.1007-385x.2019.01.014

摘要

目的:检测微小RNA-380-5p(miR-380-5p)在人宫颈癌组织和细胞系中的表达,探讨其抑制宫颈癌C33A细胞增殖和迁移的作用机制.方法:收集2016年12月至2017年7月同济医学院附属武汉中心医院妇产科手术切除的16例宫颈癌患者癌组织和对应的癌旁组织标本,以及宫颈癌细胞系HCC94、C33A、Hela、SiHa和人子宫颈上皮永生化细胞H8,用qPCR法检测miR-380-5p在癌及癌旁组织、4种宫颈癌细胞及H8细胞中的表达.用脂质体转染技术将miR-380-5p mimic(实验组)和miR-NC(阴性对照组)瞬时转染C33A细胞,用qPCR法检测转染后细胞中miR-380-5p表达,CCK-8法和Transwell小室法分别检测转染细胞的增殖和迁移能力.用生物信息学软件TargetScan预测miR-380-Sp的下游基因,用双荧光素酶报告基因实验验证miR-380-5p对下游基因Ras同源基因家族成员A(Ras homolog gene family memberA,RHOA)的结合作用,qPCR法和Western blotting检测miR-380-5p下游基因RHOA的表达.结果:宫颈癌组织中miR-380-5p表达水平明显低于癌旁组织(P＜0.01),宫颈癌细胞系中miR-380-5p表达水平均明显低于H8细胞(P＜0.05),以C33A细胞中的表达水平最低(P＜0.01).与阴性对照组比较,转染miR-380-5pmimic能显著抑制C33A细胞的增殖(P＜0.05)和迁移能力(P＜0.01),且下调RHOA、ROCK1、ROCK2、CDK2和N-cadherin蛋白的表达(均P＜0.01).生物信息学软件预测RHOA可能为miR-380-5p的调控基因,双荧光素酶报告基因实验结果显示miR-380-Sp可与RHOA3’-非编码区(UTR)特异性结合,miR-380-5p可明显下调RHOA基因的表达(P＜0.01).结论:miR-380-5p在宫颈癌组织及细胞系中低表达,过表达miR-380-Sp可能通过下调RHOA及其下游蛋白的表达抑制宫颈癌C33A细胞的增殖和迁移.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	熊国平	华中科技大学同济医学院附属武汉中心医院妇产科	5	11	3.0	3.0
2	杨长群	华中科技大学同济医学院附属武汉中心医院妇产科	2	6	2.0	2.0
3	颜琳	华中科技大学同济医学院附属武汉中心医院妇产科	2	15	2.0	2.0
4	韩炜珍	华中科技大学同济医学院附属武汉中心医院妇产科	1	3	1.0	1.0
5	姜鹍	华中科技大学同济医学院附属武汉中心医院妇产科	1	3	1.0	1.0
6	谭照平	华中科技大学同济医学院附属武汉中心医院妇产科	1	3	1.0	1.0