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摘要:
为了建立适用于基层养殖场快速、可视化的小反刍兽疫病毒(PPRV)环介导等温扩增(LAMP)检测方法,根据GenBank公布的PPRV F基因保守区核苷酸序列为靶序列,设计一组特异性LAMP引物,优化反应条件(时间、温度)和反应体系(dNTP、Mg2+、甜菜碱浓度),并进行特异性和灵敏性试验,最后用建立的方法对临床样品RNA进行检测.结果表明,所建立的方法在65℃时反应45min即可获得清晰的梯状条带;扩增物经10×SYBR GreenⅠ荧光染料染色,紫外线照射之后即可直接判定结果;灵敏性试验表明,该方法能够检出的PPRV核酸的最低浓度为8.63 ng/mL,与常规RT-PCR方法相比,灵敏度增高100倍;该方法特异性良好,与山羊痘病毒(GTPV)、羊支原体(Mccp)、羊口疮病毒(ORFV)均无交叉反应;对16份临床样品RNA检测结果显示,该方法与传统RT-PCR检测结果一致.建立的LAMP检测方法的特异性、灵敏度均好,可用于临床小反刍兽疫病毒的检测.
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内容分析
关键词云
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文献信息
篇名 小反刍兽疫病毒环介导等温扩增检测方法的建立
来源期刊 动物医学进展 学科 农学
关键词 环介导等温扩增 小反刍兽疫病毒 F基因 检测方法
年,卷(期) 2019,(3) 所属期刊栏目 研究论文
研究方向 页码范围 26-30
页数 5页 分类号 S852.65
字数 4083字 语种 中文
DOI 10.3969/j.issn.1007-5038.2019.03.005
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 李勤凡 西北农林科技大学动物医学院 64 455 12.0 18.0
2 许信刚 西北农林科技大学动物医学院 116 501 10.0 14.0
3 张琪 西北农林科技大学动物医学院 75 218 9.0 11.0
4 付明哲 西北农林科技大学动物医学院 94 346 10.0 14.0
5 郝玉青 5 13 3.0 3.0
6 徐滢 西北农林科技大学动物医学院 4 1 1.0 1.0
传播情况
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引文网络
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共引文献  (27)
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2019(1)
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研究主题发展历程
节点文献
环介导等温扩增
小反刍兽疫病毒
F基因
检测方法
研究起点
研究来源
研究分支
研究去脉
引文网络交叉学科
相关学者/机构
期刊影响力
动物医学进展
月刊
1007-5038
61-1306/S
大16开
陕西杨陵西北农林科技大学动物医学院
52-60
1980
chi
出版文献量(篇)
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22
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