小反刍兽疫病毒环介导等温扩增检测方法的建立

• 作者: 付明哲 张琪 徐滢 李勤凡 许信刚 郝玉青
• 来源期刊: 动物医学进展
• 学科: 农学
• 关键词: 环介导等温扩增 小反刍兽疫病毒 F基因 检测方法
• 年，卷（期）: 2019,（3）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 26-30
• 页数: 5页
• 分类号: S852.65
• 字数: 4083字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-5038.2019.03.005

摘要

为了建立适用于基层养殖场快速、可视化的小反刍兽疫病毒(PPRV)环介导等温扩增(LAMP)检测方法,根据GenBank公布的PPRV F基因保守区核苷酸序列为靶序列,设计一组特异性LAMP引物,优化反应条件(时间、温度)和反应体系(dNTP、Mg2+、甜菜碱浓度),并进行特异性和灵敏性试验,最后用建立的方法对临床样品RNA进行检测.结果表明,所建立的方法在65℃时反应45min即可获得清晰的梯状条带;扩增物经10×SYBR GreenⅠ荧光染料染色,紫外线照射之后即可直接判定结果;灵敏性试验表明,该方法能够检出的PPRV核酸的最低浓度为8.63 ng/mL,与常规RT-PCR方法相比,灵敏度增高100倍;该方法特异性良好,与山羊痘病毒(GTPV)、羊支原体(Mccp)、羊口疮病毒(ORFV)均无交叉反应;对16份临床样品RNA检测结果显示,该方法与传统RT-PCR检测结果一致.建立的LAMP检测方法的特异性、灵敏度均好,可用于临床小反刍兽疫病毒的检测.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李勤凡	西北农林科技大学动物医学院	64	455	12.0	18.0
2	许信刚	西北农林科技大学动物医学院	116	501	10.0	14.0
3	张琪	西北农林科技大学动物医学院	75	218	9.0	11.0
4	付明哲	西北农林科技大学动物医学院	94	346	10.0	14.0
5	郝玉青		5	13	3.0	3.0
6	徐滢	西北农林科技大学动物医学院	4	1	1.0	1.0