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小反刍兽疫病毒环介导等温扩增检测方法的建立
小反刍兽疫病毒环介导等温扩增检测方法的建立
作者:
付明哲
张琪
徐滢
李勤凡
许信刚
郝玉青
基本信息来源于合作网站,原文需代理用户跳转至来源网站获取
环介导等温扩增
小反刍兽疫病毒
F基因
检测方法
摘要:
为了建立适用于基层养殖场快速、可视化的小反刍兽疫病毒(PPRV)环介导等温扩增(LAMP)检测方法,根据GenBank公布的PPRV F基因保守区核苷酸序列为靶序列,设计一组特异性LAMP引物,优化反应条件(时间、温度)和反应体系(dNTP、Mg2+、甜菜碱浓度),并进行特异性和灵敏性试验,最后用建立的方法对临床样品RNA进行检测.结果表明,所建立的方法在65℃时反应45min即可获得清晰的梯状条带;扩增物经10×SYBR GreenⅠ荧光染料染色,紫外线照射之后即可直接判定结果;灵敏性试验表明,该方法能够检出的PPRV核酸的最低浓度为8.63 ng/mL,与常规RT-PCR方法相比,灵敏度增高100倍;该方法特异性良好,与山羊痘病毒(GTPV)、羊支原体(Mccp)、羊口疮病毒(ORFV)均无交叉反应;对16份临床样品RNA检测结果显示,该方法与传统RT-PCR检测结果一致.建立的LAMP检测方法的特异性、灵敏度均好,可用于临床小反刍兽疫病毒的检测.
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内容分析
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文献信息
篇名
小反刍兽疫病毒环介导等温扩增检测方法的建立
来源期刊
动物医学进展
学科
农学
关键词
环介导等温扩增
小反刍兽疫病毒
F基因
检测方法
年,卷(期)
2019,(3)
所属期刊栏目
研究论文
研究方向
页码范围
26-30
页数
5页
分类号
S852.65
字数
4083字
语种
中文
DOI
10.3969/j.issn.1007-5038.2019.03.005
五维指标
作者信息
序号
姓名
单位
发文数
被引次数
H指数
G指数
1
李勤凡
西北农林科技大学动物医学院
64
455
12.0
18.0
2
许信刚
西北农林科技大学动物医学院
116
501
10.0
14.0
3
张琪
西北农林科技大学动物医学院
75
218
9.0
11.0
4
付明哲
西北农林科技大学动物医学院
94
346
10.0
14.0
5
郝玉青
5
13
3.0
3.0
6
徐滢
西北农林科技大学动物医学院
4
1
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1.0
传播情况
被引次数趋势
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引文网络
引文网络
二级参考文献
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共引文献
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参考文献
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节点文献
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同被引文献
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二级参考文献(2)
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2019(1)
参考文献(0)
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引证文献(1)
二级引证文献(0)
2019(1)
引证文献(1)
二级引证文献(0)
研究主题发展历程
节点文献
环介导等温扩增
小反刍兽疫病毒
F基因
检测方法
研究起点
研究来源
研究分支
研究去脉
引文网络交叉学科
相关学者/机构
期刊影响力
动物医学进展
主办单位:
西北农林科技大学
出版周期:
月刊
ISSN:
1007-5038
CN:
61-1306/S
开本:
大16开
出版地:
陕西杨陵西北农林科技大学动物医学院
邮发代号:
52-60
创刊时间:
1980
语种:
chi
出版文献量(篇)
7631
总下载数(次)
22
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