手足口病主要病原EV71衣壳蛋白的基因克隆与表达

• 作者: 刘爱华 梁婕
• 来源期刊: 中国医学创新
• 关键词: EV71 基因克隆 蛋白表达
• 年，卷（期）: 2019,（6）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 5-8
• 页数: 4页
• 字数: 2829字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-4985.2019.06.002

摘要

目的:构建EV71基因的原核表达载体,并在原核细胞中进行表达与纯化.方法:根据已知EV71全长核酸序列设计引物,用PCR方法扩增VP1、VP2、VP3和VP4四个基因片段,对目的基因进行酶切并克隆至pET-14b原核表达载体中,转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,IPTG诱导表达;所获得的不可溶性蛋白经尿素裂解超声,亲和层析纯化,用SDS-PAGE检测表达产物.结果:测序证实原核重组质粒构建成功;可表达高纯度的四个蛋白,且蛋白大小与预计值相符.结论:成功构建了手足口病主要致病原肠道病毒71型(EV71)的四个衣壳蛋白VP1、VP2、VP3和VP4的原核表达载体,并纯化得到高纯度的四个蛋白,为进一步研究手足口病致病机制奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘爱华		31	165	8.0	11.0
2	梁婕		1	2	1.0	1.0