人CYP4Z1基因重组慢病毒载体的构建、鉴定及抑制乳腺癌细胞增殖

• 作者: 余伟 吴杰 唐立华 张秀 王清
• 来源期刊: 基础医学与临床
• 学科: 医学
• 关键词: CYP4Z1 乳腺癌 细胞增殖 慢病毒表达载体
• 年，卷（期）: 2019,（2）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 175-181
• 页数: 7页
• 分类号: Q782|Q784|R737.9
• 字数: 4112字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-6325.2019.02.005

摘要

目的 研究CYP4Z1 RNAi慢病毒表达载体作用人乳腺癌细胞后对CYP4Z1 mRNA表达及对细胞增殖和MAPK信号通路的影响.方法 用RT-PCR和Western blot检测MDA-MB-468、T-47D和MDA-MB-231细胞中CYP4Z1的表达.构建3种CYP4Z1 RNAi慢病毒载体,转染CYP4Z1高表达的乳腺癌细胞,筛选出干扰效果最好的靶点序列.用RT-PCR检测转染后CYP4Z1 mRNA表达.用MTT和Western blot分别检测CYP4Z1 siRNA后对乳腺癌细胞增殖和MAPK信号通路的影响.结果 在MDA-MB-468细胞中CYP4Z1 mRNA和蛋白表达显著高于MDA-MB-231及T-47D乳腺癌细胞(P<0.05).成功构建了3组重组慢病毒载体(LV-CYP4Z1-RNAi-1/2/3),3组重组慢病毒感染MDA-MB-468细胞系后,CYP4Z1 mRNA的表达受到抑制,其中以LV-CYP4Z1-RNAi-2组抑制作用最显著,敲减率达到81％(P<0.01).与正常对照组相比,CYP4Z1-RNAi-2组MDA-MB-468细胞增殖受到抑制,p-ERK1/2表达水平显著降低(P<0.05).结论 成功构建了CYP4Z1 RNAi慢病毒表达载体,且CYP4Z1-RNAi-2可通过下调ERK1/2通路抑制乳腺癌MDA-MB-468细胞的增殖.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张秀	三峡大学第一临床学院宜昌市中心人民医院肿瘤科	5	0	0.0	0.0
2	唐立华	三峡大学第一临床学院宜昌市中心人民医院肿瘤科	5	23	2.0	4.0
3	王清	三峡大学第一临床学院宜昌市中心人民医院消化内科	5	16	2.0	4.0
4	吴杰	三峡大学医学院基础医学实验中心	17	74	6.0	8.0
5	余伟	三峡大学第一临床学院宜昌市中心人民医院肿瘤科	5	5	2.0	2.0