hsa-miR-448过表达下调HIF-1α对结肠癌细胞SW480作用及机制研究

• 作者: 吴凤丽 歧红阳 王云溪 王志民 王蕾 肖占宇 董志超
• 来源期刊: 中国免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: miR-448 HIF-1α 结肠癌 侵袭 迁移 EMT
• 年，卷（期）: 2019,（19）
• 所属期刊栏目: 肿瘤免疫学
• 页码范围: 2350-2356
• 页数: 7页
• 分类号: R734.2
• 字数: 5529字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-484X.2019.19.009

摘要

目的:本研究旨在探讨小RNA-448(miR-448)在结肠癌发生和发展中的作用及其潜在的分子机制.方法:先用基因预测软件:miRanda、TarBase和TargetScan预测miR-448的靶基因,并用荧光素实验验证靶向关系;然后miR-448 mimic与pcDNA-HIF-1α单独或联合转染SW480细胞,并用RT-PCR检测miR-448和缺氧诱导因子1α(HIF-1α)的表达,Transwell检测细胞侵袭情况,划痕实验检测细胞的迁移能力,蛋白印迹检测HIF-1α、E-cadherin、Vimentin、N-cadherin;P38和Hsp27的蛋白表达;miR-448 inhibitor转染结肠癌细胞SW480、10μmol/L SB203580处理结肠癌细胞SW480单独或联合进行,RT-PCR检测miR-448的表达,蛋白印迹检测HIF-1α、P38和Hsp27的表达,Transwell检测细胞侵袭;裸鼠皮下注射miR-448 mimic转染结肠癌细胞SW480,检测30 d时移植瘤重量,RT-PCR检测miR-448和HIF-1α的表达,免疫组化检测Vimentin的表达,蛋白印迹法检测P38和Hsp27的表达.结果:miR-448与HIF-1α在3'UTR区存在结合位点,miR-448和HIF-1α存在靶向关系,并且miR-448对HIF-1α表达具有抑制作用;SW480细胞过表达miR-448后,HIF-1α表达量下调,细胞侵袭和迁移速度减慢,E-cadherin的表达显著上调,而N-cadherin和Vimentin的表达显著下调;低表达miR-448后,HIF-1α、P38和Hsp27表达量显著增加,细胞侵袭数目显著增多;小鼠转染MIR-448 mimic后,移植瘤重量显著减轻,miR-448表达量显著上调,HIF-1α表达量显著下调,Vimentin阳性比率明显降低,P38和Hsp27表达量显著下调.结论:在结肠癌细胞SW480中,过表达hsa-miR-448下调HIF-1α来减弱细胞的侵袭迁移能力以及抑制上皮间质转化,从而抑制结肠癌的发生和发展.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王蕾		66	364	6.0	18.0
2	董志超	新乡市中心医院消化内科	11	45	4.0	6.0
3	王云溪	新乡市中心医院消化内科	17	77	4.0	8.0
4	王志民	新乡市中心医院消化内科	4	38	2.0	4.0
5	歧红阳	新乡市中心医院消化内科	9	70	4.0	8.0
6	肖占宇	新乡市第一人民医院体检科	4	3	1.0	1.0
7	吴凤丽	新乡市中心医院消化内科	2	7	1.0	2.0