融合蛋白基因与抗体基因电转染CHO-S细胞的条件摸索优化

• 作者: 冯英 易天红 杨晓佳 柯潇 赖维莉 邓晓芬
• 来源期刊: 生物技术通报
• 关键词: 融合蛋白 抗体 电转染 转染效率
• 年，卷（期）: 2019,（4）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 223-228
• 页数: 6页
• 语种: 中文
• DOI: 10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2018-0700

摘要

旨在对编码融合蛋白和抗体的重组质粒转染CHO-S细胞的转染条件进行摸索优化,提高外源基因的转染效率,从而增加外源蛋白的表达.应用Amaxa Nucleofector-Ⅱ 电转仪,从电转染程序、质粒用量及细胞用量三方面着手,最终发现编码融合蛋白的重组质粒的最佳电转条件为:电转程序U-030,质粒用量20μg/孔,细胞用量1×107个/孔;编码抗体的重组质粒的最佳电转条件为:电转程序U-024,质粒用量15μg/孔,细胞用量1×107个/孔;实验结果进一步显示抗体重组质粒电转染CHO-S细胞的效果要优于融合蛋白重组质粒,利用高通量细胞筛选仪Clone Pix对转染后重组细胞的阳性克隆数进行统计,证实了该抗体重组质粒的转染效率更高.这为以后的抗体及融合蛋白重组质粒电转染CHO-S细胞提供了一定的数据支持,同时提示不同类型的细胞及外源基因,都需要设计相应的电转染实验进行条件优化,进而为获得高产稳定的生产用细胞株奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	柯潇	成都康弘药业集团股份有限公司产品技术中心	29	57	5.0	6.0
2	赖维莉	成都康弘药业集团股份有限公司产品技术中心	2	1	1.0	1.0
3	易天红	成都康弘药业集团股份有限公司产品技术中心	2	1	1.0	1.0
4	邓晓芬	成都康弘药业集团股份有限公司产品技术中心	1	0	0.0	0.0
5	杨晓佳	成都康弘药业集团股份有限公司产品技术中心	1	0	0.0	0.0
6	冯英	成都康弘药业集团股份有限公司产品技术中心	1	0	0.0	0.0